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山寨馬克思銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
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參考參考Turesny i等( 2000) 及Takahama 和Onik i ( 1992) 提供的方法測定果實(shí)中抗壞血酸含量，酶液的粗提�。悍Q取約0.5 g 鮮樣在5% 的偏磷酸中研磨勻漿, 于4 ℃ 13000 rpm離心20m in, 收集上清液用于測定A sA 和DHA的含量。 ASA含量的確定：測定AsA 時(shí), 吸取100 μL的上清液加入2 mL 100mmol/ L磷酸鉀緩沖 液( pH 6.8) 中, 當(dāng)加入1 U 的抗壞血酸氧化酶( EC 11033, 來自Cucurbitasp ) 后記錄265 nm下的吸光值變化。 DHA含量測定：測定DHA 時(shí), 吸取等量的上清液加入2mL 100mmol/ L - 1磷酸鉀緩沖液( pH 6.8)中, 當(dāng)加入2mmol/L DTT后開始記錄265 nm下的吸光值變化。 同時(shí)用一系列已知濃度的AsA 和DHA ( Sigma公司) 溶液用相同的方法測定吸光值, 作標(biāo)準(zhǔn)曲線以計(jì)算樣品中AsA、DHA 和A sA +DHA 含量。 請(qǐng)問標(biāo)準(zhǔn)曲線怎么做�。渴俏舛葐挝粫r(shí)間內(nèi)的變化與ASA濃度的曲線圖么？最后怎么算樣品中ASA、DHA的含量？這個(gè)方法的原理到底是怎樣的��？鄙人比較菜，還望高人詳細(xì)講解，并指點(diǎn)一二，萬分感激。 |
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