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thestormcong銀蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
氨芐平板
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| 請(qǐng)教關(guān)于氨芐平板的一系列知識(shí)，例如抗性維持時(shí)間，會(huì)不會(huì)長(zhǎng)雜菌，大腸桿菌是否很多都對(duì)它具有抗性。 |
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西瓜
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
thestormcong(金幣+4): ★★★很有幫助 2012-03-14 10:21:55
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
thestormcong(金幣+4): ★★★很有幫助 2012-03-14 10:21:55
| 氨芐平板放到37℃后，抗性大約能維持十幾個(gè)小時(shí)。所以轉(zhuǎn)化后在37度放的時(shí)間一般就半天多，沒(méi)有就是沒(méi)有，放久了長(zhǎng)出來(lái)的都是雜菌啦。 |
thestormcong4樓2012-03-13 23:52:23
panda73
金蟲(chóng) (小有名氣)
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【答案】應(yīng)助回帖
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thestormcong(金幣+6): ★★★很有幫助 2012-03-13 22:06:33
西瓜(金幣+2): Good！ 2012-03-13 23:50:47
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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西瓜(金幣+2): Good！ 2012-03-13 23:50:47
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氨芐平板一般4度放置2周（但需要注意密封保濕）不會(huì)有問(wèn)題。 一般的E.coli都沒(méi)有氨芐抗性 但與其他抗生素相比，氨芐有兩個(gè)特點(diǎn)：1.氨芐只能抑制無(wú)抗性的細(xì)菌生長(zhǎng)，而不能殺死細(xì)菌；2. 氨芐抗性基因編碼的是一個(gè)分泌蛋白（b-內(nèi)酰胺酶），因而，抗性克隆會(huì)將其產(chǎn)生的內(nèi)酰胺酶分泌到周?chē)呐囵B(yǎng)基中，因而導(dǎo)致其周?chē)目股乇唤到�，從而在抗性克隆周�(chē)霈F(xiàn)衛(wèi)星菌落（這些菌落并沒(méi)有抗性）。 因而在使用氨芐抗性平板時(shí)需要注意培養(yǎng)時(shí)間不要過(guò)長(zhǎng)（12個(gè)小時(shí)左右即可），否則容易出現(xiàn)大量的衛(wèi)星菌落。 |
2樓2012-03-13 21:23:24
thestormcong
銀蟲(chóng) (小有名氣)
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謝謝。我在做轉(zhuǎn)化，抗性平板上長(zhǎng)了很多菌，陰性對(duì)照也有長(zhǎng)，但相對(duì)轉(zhuǎn)化平板很少，于是挑取轉(zhuǎn)化子鑒定質(zhì)粒，提取不到，得知質(zhì)粒拷貝數(shù)低，于是設(shè)計(jì)該質(zhì)粒的引物來(lái)鑒定，可是pcr結(jié)果還是沒(méi)有。現(xiàn)在懷疑挑的轉(zhuǎn)化子是不是有抗性的雜菌，而且它沒(méi)有質(zhì)粒，因?yàn)樘崛〔坏劫|(zhì)粒。我挑的時(shí)候也是看形態(tài)正常的，請(qǐng)教你了。 |
3樓2012-03-13 22:15:56
thestormcong
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5樓2012-03-14 10:16:59
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