mangguolala

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[交流] 請(qǐng)教在細(xì)胞懸液中讓細(xì)胞失活但使細(xì)胞膜不崩解的方法

我想用失活的細(xì)胞做該種活細(xì)胞的對(duì)照來(lái)進(jìn)行該細(xì)胞某種生化反應(yīng)的研究。我的體系是HEPES緩沖液，請(qǐng)教大家能有什么物理或化學(xué)方法既能使細(xì)胞失活又能保持其完整的細(xì)胞形態(tài)（大約保持3小時(shí)）。同時(shí)又不給整個(gè)體系引入新的物質(zhì)（或能除去）。
誠(chéng)求教，歡迎大家與我討論實(shí)現(xiàn)的方法，或是給我否定該想法的理由。
謝謝~

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1樓 2012-03-19 10:50:11

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mangguolala(金幣+1): 謝謝參與
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mangguolala: 金幣+10, 謝謝交流！ 2012-04-05 20:22:09

可以用1%多聚甲醛，70%乙醇；
不過(guò)使用后蛋白失去活性，不知是否樓主需要的結(jié)果。

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2樓2012-03-19 11:07:36

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2樓: Originally posted by ken126 at 2012-03-19 11:07:36:
可以用1%多聚甲醛，70%乙醇；
不過(guò)使用后蛋白失去活性，不知是否樓主需要的結(jié)果。

非常感謝回復(fù)，正是需要使蛋白失活。請(qǐng)問(wèn)這樣處理后如果用離心清洗的方法去除緩沖體系中的多聚甲醛和乙醇，細(xì)胞形態(tài)會(huì)遭到破壞嗎？

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3樓2012-03-19 15:11:33

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telomerase: 金幣+1, 謝謝你的熱心應(yīng)助 2012-03-19 16:51:15

應(yīng)該不會(huì)了，但操作要小心，最好在低溫進(jìn)行，去除后盡快將實(shí)驗(yàn)結(jié)束，不要放置太長(zhǎng)時(shí)間。

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4樓2012-03-19 15:18:12

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mangguolala(金幣+1): 謝謝參與
看天: 金幣+2, 鼓勵(lì)交流 2012-03-20 15:23:04

加熱會(huì)破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)嗎？

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5樓2012-03-19 16:04:50

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5樓: Originally posted by alqfren at 2012-03-19 16:04:50:
加熱會(huì)破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)嗎？

謝謝討論，不太清楚，不過(guò)加熱應(yīng)該會(huì)使細(xì)胞膜破壞細(xì)胞質(zhì)會(huì)溶出吧~
我有想過(guò)用超聲，不知有沒(méi)有依據(jù)~

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6樓2012-03-19 19:32:32

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4樓: Originally posted by ken126 at 2012-03-19 15:18:12:
應(yīng)該不會(huì)了，但操作要小心，最好在低溫進(jìn)行，去除后盡快將實(shí)驗(yàn)結(jié)束，不要放置太長(zhǎng)時(shí)間。

不過(guò)用1%多聚甲醛，70%乙醇處理多長(zhǎng)時(shí)間比較合適呢，是在培養(yǎng)基中加入還是在細(xì)胞懸液中呢~

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7樓2012-03-19 19:35:02

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mangguolala: 金幣+6, 謝謝交流~ 2012-04-05 20:22:46

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6樓: Originally posted by mangguolala at 2012-03-19 19:32:32:
謝謝討論，不太清楚，不過(guò)加熱應(yīng)該會(huì)使細(xì)胞膜破壞細(xì)胞質(zhì)會(huì)溶出吧~
我有想過(guò)用超聲，不知有沒(méi)有依據(jù)~

超聲恐怕不行吧，很多時(shí)候?qū)嶒?yàn)室破碎細(xì)胞會(huì)用超聲。

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8樓2012-03-20 08:54:26

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8樓: Originally posted by alqfren at 2012-03-20 08:54:26:
超聲恐怕不行吧，很多時(shí)候?qū)嶒?yàn)室破碎細(xì)胞會(huì)用超聲。

謝謝，了解了~

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9樓2012-03-20 09:15:49

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13樓: Originally posted by youfengling at 2012-03-20 09:24:00:

同胞們啊，不帶這樣的啊~只拿金幣卻不與我交流，我這就剩刷屏了，體諒一下我實(shí)驗(yàn)做不出來(lái)想跟大家交流的心情吧~

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14樓2012-03-20 17:08:35

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11樓: Originally posted by 從頭開(kāi)始 at 2012-03-20 09:20:24:

同胞們啊，不帶這樣的啊~只拿金幣卻不與我交流，我這就剩刷屏了，體諒一下我實(shí)驗(yàn)做不出來(lái)想跟大家交流的心情吧~

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15樓2012-03-20 17:08:44

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從頭開(kāi)始

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15樓: Originally posted by mangguolala at 2012-03-20 17:08:44:
同胞們啊，不帶這樣的啊~只拿金幣卻不與我交流，我這就剩刷屏了，體諒一下我實(shí)驗(yàn)做不出來(lái)想跟大家交流的心情吧~

sorry沒(méi)看到

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16樓2012-03-20 17:30:10

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簡(jiǎn)單回復(fù)

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2012-03-20 09:20 回復(fù)

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從頭開(kāi)始11樓

2012-03-20 09:20 回復(fù)

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