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輔酶Q提取
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| 各位大俠,誰做過輔酶Q(泛醌)的提取,方法是什么。我現(xiàn)在用的甲醇/丙酮法提取,效果不是太好。 |
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木蟲 (小有名氣)

木蟲 (小有名氣)
木蟲 (正式寫手)
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(1) 在 250ml 圓底燒瓶中加入 20~25g 濕菌體,然后加入 2.5~4g 焦性沒石子酸,最后加入 100ml 10%(W/V)的堿甲醇。 (2) 接上回流管,在沸水浴中回流 30min,回流結(jié)束后迅速用自來水冷卻至 室溫度。 (3) 將皂化液轉(zhuǎn)移入 200ml 離心瓶中,5000rpm 離心 10min,去除底部沉淀物留上清液。 (4) 將上清液每次以 40ml 石油醚或正己烷萃取,5000rpm 離心 15min 以分層,連續(xù)萃取三次。 (5) 合并萃取液反復(fù)用水洗至中性,并加入 5g 無水硫酸鈉干燥液體。 (6) 將萃取液轉(zhuǎn)移至 250ml 圓底燒瓶中用薄膜蒸發(fā)器減壓濃縮,水浴溫度控 制在 55~60℃,待萃取液濃縮至 1ml 左右停止?jié)饪s。 (7) 將濃縮液收集至 5ml 離心管中于-20℃放置 2 小時(或過夜),離心去除沉淀物。 (8) 離心后的上清液繼續(xù)以薄膜蒸發(fā)器減壓濃縮,直至蒸干,濃縮時水浴溫 度控制在 60℃以內(nèi)。 (9) 趁熱以數(shù)滴無水乙醇將油狀物轉(zhuǎn)移至 EP 管中,-20℃靜置過夜結(jié)晶。 |
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