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我是小純潔金蟲 (正式寫手)
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[求助]
搖菌 怪事
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AMP抗性。DH5a. 轉(zhuǎn)化、涂板以后，菌落pcr有條帶。amp液體培養(yǎng)基也能搖起來。但是提不出質(zhì)粒，后經(jīng)抽提核酸，得知，沒有質(zhì)粒被轉(zhuǎn)入。 1.為什么菌落pcr能有條帶，但卻沒有質(zhì)粒？ 2.為什么沒有質(zhì)粒，卻能搖起來？ |
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zhaohq1209
鐵桿木蟲 (著名寫手)
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1.菌落PCR假陽性的情況經(jīng)常出現(xiàn)。這是由于轉(zhuǎn)化所用的質(zhì)�；蜻B接產(chǎn)物的濃度和總量都較高，導(dǎo)致平板表面有大量的PCR模板。lz可以嘗試刮取平板上無菌落的地方來做PCR，也有相當(dāng)一部分是陽性。 2.amp容易失效，且根據(jù)其抑菌原理，能產(chǎn)生衛(wèi)星菌落。所以我在試驗中一般都避免使用amp，如果使用濃度一般用150. |
2樓2012-03-22 11:49:30
快樂常在
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3樓2012-03-22 18:38:17
我是小純潔
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4樓2012-03-22 19:14:59
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