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1樓 2012-03-25 13:02:25

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atlanticwi

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西瓜: 金幣+2, 鼓勵(lì)~今天很活躍啊 2012-03-25 16:21:28

嗯.......
這個(gè)，感受態(tài)制好后，可以在冰水混合物上放置較長(zhǎng)時(shí)間，一旦開(kāi)始轉(zhuǎn)化，除了轉(zhuǎn)化完后可以冷卻時(shí)間有所調(diào)整，到菌復(fù)蘇、涂板各步驟，真想不起哪部可以停較長(zhǎng)時(shí)間了.........所以我覺(jué)得一旦開(kāi)始做最好就不要停了

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2樓2012-03-25 13:49:08

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telomerase

至尊木蟲 (著名寫手)

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西瓜: 金幣+2, 斑斑百忙之中來(lái)幫忙啊~ 2012-03-25 16:22:07

如是轉(zhuǎn)化質(zhì)粒，問(wèn)題不大，實(shí)在不行就混混熱激下稍稍咬下直接圖了，要不冰著，連接產(chǎn)物就不太好停了。

制備感受態(tài)，以前中間沒(méi)停過(guò)，但我覺(jué)得冰浴那幾部多放放應(yīng)該問(wèn)題不大，僅供參考。

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3樓2012-03-25 13:57:58

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aoaoshch

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停一下，可能效率就降低了。最好別停啊。
從-70度拿出感受態(tài)CELL，冰上待融，5分鐘。
加你的片段，混勻，冰浴10～30分鐘。
42度熱激1分鐘，冰浴1分鐘，加培養(yǎng)基孵育40～60分鐘。
涂板，5分鐘。
你看看能否抽出時(shí)間……

做實(shí)驗(yàn)最好不要忙其他的，一會(huì)就忘了到哪一步了。

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4樓2012-03-26 22:11:33

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良民123

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孵育的時(shí)候可以降低轉(zhuǎn)速，就可以稍微孵育長(zhǎng)一些時(shí)間

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5樓2012-03-26 22:43:56

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cgspider

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轉(zhuǎn)化的過(guò)程中，時(shí)間和溫度都很重要，一點(diǎn)兒都不得停。。

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6樓2012-03-27 10:44:22

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跳跳魚

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不能停吧要想停一下就是加培養(yǎng)基后復(fù)蘇時(shí)1個(gè)小時(shí) 你可以干其他滴

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7樓2012-03-27 21:51:02

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scienzyme

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轉(zhuǎn)化大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞時(shí)，如果是完好的質(zhì)粒，可以省略掉37度復(fù)蘇振蕩培養(yǎng)的步驟，熱激后在冰上靜置1分鐘即可涂平板。如果是剛剛連接完的產(chǎn)物，則要在37度振蕩1小時(shí)。

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8樓2012-03-28 11:14:34

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