 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1650 | 回復(fù): 3 | ||||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | ||||
KELL新蟲 (初入文壇)
|
[交流]
常用酶的配制 已有3人參與
|
|||
|
實(shí)驗(yàn)步驟 1．溶菌酶 用水配制成50mg/ml的溶菌酶溶液，分裝成小份并保存于-20℃。每一小份一經(jīng)使用后便予丟棄。 2．蛋白水解酶類 a：鏈霉蛋白酶是從鏈球菌（Streptomyces griseus）中分離到的一種絲氨酸酶和酸性蛋白酶的混合物。 b：自消化可消除DNA酶和RNA酶的污染，經(jīng)自消化的鏈酶蛋白酶的配制方法如下：把該酶的粉末溶解于10mmol./l Tris·HCl(pH7.5)、10mmol/l NaCl中，配成20mg/ml濃度，于37℃溫育1h。經(jīng)消化的鏈霉蛋白酶分裝成小份放在密封試管中，保存-20℃。 c：蛋白酶K是一種枯草蛋白酶類的高活性蛋白酶，從林伯氏白色念球菌（Tritirachium album Limber）中純化得到。該酶有兩個(gè)Ca2 結(jié)合位點(diǎn)，它們離酶的活性中心有一定距離，與催化機(jī)理并無(wú)直接關(guān)系。然而，如果從該酶中除去Ca2 ，由于出現(xiàn)遠(yuǎn)程的結(jié)構(gòu)變化，催化活性將喪失80%左右，但其剩余活性通常已足以降解在一般情況下污染酸制品的蛋白質(zhì)。所以，蛋白酶K消化過(guò)程中通常加入EDTA（以抑制依賴于Mg2 的核酸酶的作用）。但是，如果要消化對(duì)蛋白酶K具有較強(qiáng)耐性的蛋白，如角蛋白一類，則可能需要使用含有1mmol/l Ca2 而不含EDTA的緩沖液。在消化完畢后、純化核酸前要加入EGT（pH8.0）至終濃度為2mmol/L,以鰲合Ca2 。 3．無(wú)DNA酶的RNA酶 將胰RNA酶（RNA酶A）溶于10mmol/l Tris·HCl(pH7.5)、15mmol/l NaCl中，配成10mg/ml的濃度，于100℃加熱15min，緩慢冷卻至室溫，分裝成小份保存于-20℃。 來(lái)源：everllab實(shí)驗(yàn)管理 |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 ChIP |
» 猜你喜歡
070300化學(xué)求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
311求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
生物學(xué)調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
269專碩求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
08工科 320總分 求調(diào)劑
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
尋找調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
291 求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
一志愿北京化工大學(xué)070300 學(xué)碩336求調(diào)劑
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
一志愿東華大學(xué)化學(xué)070300，求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
318求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 怎么配制2%的溶菌酶溶液
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 纖維素酶和果膠酶如何配制溶液
已經(jīng)有21人回復(fù)
- 請(qǐng)問食品中常用的酶制劑有哪些，還有主要應(yīng)用在哪呢？
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 溶菌酶緩沖液配制，急急急！
已經(jīng)有3人回復(fù)
- Dnase 1，Rnase A和蛋白酶K的配制
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 凝血酶溶液的配制及適配體傳感器
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 兩個(gè)月前配制的普魯蘭酶，在冰箱中儲(chǔ)存。�！，F(xiàn)在還能否使用
已經(jīng)有2人回復(fù)
- 【求助/交流】請(qǐng)問，酶溶液的配制方法！
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 【求助/交流】急，請(qǐng)求高人指點(diǎn)，實(shí)驗(yàn)用乳酸脫氫酶稀釋液怎么配制？
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 【求助】纖維素酶水溶液的配制方法
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【求助】蛋白酶K溶液的配制
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助/交流】彈性蛋白酶（Elastase）溶液的配制及其作用底物
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【討論】ACE酶配制后如何保存
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 生物酶溶液的配制及注意事項(xiàng)
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助/交流】【土壤酶】蔗糖酶測(cè)定方法中苯甲酸的配制
已經(jīng)有15人回復(fù)
119904386
鐵蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 14 (小學(xué)生)
- 金幣: 1120.3
- 散金: 110
- 紅花: 2
- 帖子: 82
- 在線: 72.4小時(shí)
- 蟲號(hào): 1049516
- 注冊(cè): 2010-06-29
- 性別: GG
- 專業(yè): 獸醫(yī)傳染病學(xué)
3樓2013-06-14 11:30:24
4樓2016-07-12 14:38:19
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +3 | 26研0 2026-03-20 | 3/150 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 尋找調(diào)劑 +3 | 倔強(qiáng)芒? 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +7 | Auroracx 2026-03-22 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 初試 317 +7 | 半拉月丙 2026-03-20 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 材料工程專碩 348分求調(diào)劑 +3 | 冬辭. 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 297求調(diào)劑 +3 | 喜歡還是不甘心 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 266求調(diào)劑 +3 | 哇呼哼呼哼 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +4 | 某某某某位 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 332求調(diào)劑 +3 | 鳳凰院丁真 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 316求調(diào)劑 +6 | 梁茜雯 2026-03-19 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿華南師大 070300（化學(xué)）304分求調(diào)劑 +3 | 0703武芊慧雪304 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿 西北大學(xué) ，070300化學(xué)學(xué)碩，總分287，雙非一本，求調(diào)劑。 +3 | 晨昏線與星海 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 329求調(diào)劑 +9 | 想上學(xué)吖吖 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑一志愿南京航空航天大學(xué)289分 +3 | @taotao 2026-03-19 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 295材料求調(diào)劑，一志愿武漢理工085601專碩 +5 | Charlieyq 2026-03-19 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料與化工專碩調(diào)劑 +7 | heming3743 2026-03-16 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 298-一志愿中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)-求調(diào)劑 +9 | 手機(jī)用戶 2026-03-17 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 材料專碩306英一數(shù)二 +10 | z1z2z3879 2026-03-16 | 13/650 |
|
|
|
[論文投稿] 有沒有大佬發(fā)小論文能帶我個(gè)二作 +3 | 增銳漏人 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 070303 總分349求調(diào)劑 +3 | LJY9966 2026-03-15 | 5/250 |
|