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gylry銅蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
信號(hào)通路
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| 如何研究某個(gè)蛋白所處的信號(hào)通路呢(在信號(hào)通路中并沒(méi)有搜索到該蛋白)?詳細(xì)說(shuō)就是:知道該蛋白所在的家族,且該家族中的蛋白所處的通路能夠找到,但是該蛋白卻搜索不到,不知道該蛋白在哪里發(fā)揮作用,那如何研究該蛋白的功能呢?請(qǐng)高人指點(diǎn)。 |
銅蟲(chóng) (小有名氣)
鐵蟲(chóng) (初入文壇)
銅蟲(chóng) (小有名氣)
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先構(gòu)建你的實(shí)驗(yàn)材料的CDNA文庫(kù)(可以由公司代勞),然后將你的蛋白基因CDS序列構(gòu)建到文庫(kù)相應(yīng)的載體上,然后利用酵母雙雜來(lái)篩選出能和你的蛋白相互作用的蛋白,有可能會(huì)篩選出很多,也可能篩選不出來(lái) 至于文庫(kù),不知道你用的材料是什么,CDNA文庫(kù)不一定全面,因?yàn)檫@個(gè)文庫(kù)是建立在MRNA反轉(zhuǎn)錄序列上,也就是說(shuō)如果該蛋白的的下游蛋白如果在你取材時(shí)期沒(méi)有表達(dá)的話(huà),文庫(kù)里面就沒(méi)有了,最好能做個(gè)全基因的,那個(gè)比較全面,但相應(yīng)的篩選的難度也增大了 |
銅蟲(chóng) (小有名氣)
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銀蟲(chóng) (小有名氣)
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