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俊靈銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
不同PH下熒光能量共振轉(zhuǎn)移發(fā)生的情況比較，只有一個點沒發(fā)生FRET，原因是什么？
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我最近在做一個實驗，用一種生物材料D檢測多巴胺，生物材料D的發(fā)射光譜與多巴胺的吸收光譜部分重合，但D與抗壞血酸AA的吸收光譜也有部分重合，抗壞血酸是檢測多巴胺最常見的干擾物，我想消除抗壞血酸的干擾，原來想法是利用增大PH值，增加生物材料D與AA的距離，這樣熒光共振能量轉(zhuǎn)移就不會發(fā)生，做的圖如下。 原來以為隨著PH增加，生物材料D和AA間的距離越大，那么達到某一個點后，后面就都是平臺，但檢測結(jié)果顯然不是這樣，達到PH8.9時，然后又反彈了，又出現(xiàn)一定的熒光共振能量轉(zhuǎn)移。為什么只在PH8.9的時候不會有熒光共振能量轉(zhuǎn)移？大家認為是什么原因呢？ 抗壞血酸的PKa值是4.17和11.6，多巴胺的PKa指是9.17。 生物材料D在加入抗壞血酸AA后，D的熒光強度變化值隨PH的變化。 |
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markar
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