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蟲(chóng)子火箭兵

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9樓: Originally posted by dfm1987 at 2012-04-14 10:20:27
謝謝！但是我擴(kuò)增的方向好像沒(méi)有錯(cuò)，是往RB區(qū)域以外擴(kuò)增的，但是得到1000bp左右的RB上游載體序列，沒(méi)有得到植株基因組的序列...

我目前也遇到了同樣的問(wèn)題，第三輪特異條帶大概是3kb,但是沒(méi)有植物基因組的信息，都是載體信息，也是RB外側(cè)基因，有些文獻(xiàn)報(bào)道可能是骨架確實(shí)是插入到植物染色體中，可以根據(jù)已知的序列繼續(xù)設(shè)計(jì)引物TAIL，

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11樓2013-05-10 11:17:21

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qin.xiaoyue

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我用的是pPZPY122載體，也是遇到相同的情況，從RB向外設(shè)計(jì)的引物，測(cè)序得到的結(jié)果卻是RB上游的結(jié)果。同求高人指點(diǎn)。

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12樓2014-01-10 14:38:42

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我現(xiàn)在也在做PB121的插入位點(diǎn)側(cè)翼序列分析，困惑的是我現(xiàn)在無(wú)法確認(rèn)RB與LB的序列，因此也不能設(shè)計(jì)特異引物，可不可以告訴我兩側(cè)的側(cè)翼序列？急求

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13樓2014-03-20 11:01:54

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【答案】應(yīng)助回帖

求助PB121的兩側(cè)LB與RB序列

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14樓2014-03-20 11:10:19

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8樓: Originally posted by lzh860801 at 2012-04-10 17:10:04
lz你的情況和我很相似啊
我是設(shè)計(jì)的LB的引物然后調(diào)到了載體內(nèi)部去了
序列比對(duì)的時(shí)候發(fā)現(xiàn)NCBI上面PBI121這個(gè)載體有幾個(gè)修改過(guò)的它們的LB RB是反的所以我目前把引物反過(guò)來(lái)設(shè)計(jì)準(zhǔn)備重新調(diào)了

有結(jié)果了嗎？我也是擴(kuò)出來(lái)的都是載體序列

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15樓2014-03-20 13:25:28

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我現(xiàn)在遇到了和你相同的問(wèn)題，懷疑不止一個(gè)T-DNA插入，樓主你的問(wèn)題解決了嗎

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16樓2014-07-27 22:07:32

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11樓: Originally posted by 蟲(chóng)子火箭兵 at 2013-05-10 11:17:21
我目前也遇到了同樣的問(wèn)題，第三輪特異條帶大概是3kb,但是沒(méi)有植物基因組的信息，都是載體信息，也是RB外側(cè)基因，有些文獻(xiàn)報(bào)道可能是骨架確實(shí)是插入到植物染色體中，可以根據(jù)已知的序列繼續(xù)設(shè)計(jì)引物TAIL，...

你好，請(qǐng)問(wèn)你后來(lái)問(wèn)題解決了嗎？我現(xiàn)在也遇到這個(gè)問(wèn)題，是載體骨架也插入到植物基因組中去了嗎？

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17樓2017-11-26 11:01:19

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