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[求助]
求助,real-time PCR 標準樣品和部分待測樣品,沒有CT值 已有1人參與
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剛做real-time PCR,遇見了一個大問題,待高手解答,先謝謝了! 我的標準樣品和待測樣品中的8個,都沒有CT值 probe用的是TaqMan PCR 反應溶液組分: DNA 2 uL, 50-150 ng, 260/280 都在1.8-2.1之間, probe: 2 pmol primers: 4 pmol master mix: 10 ul 總共: 20 uL plasmid DNA作為標準DNA模板,待測DNA來于活性污泥,目標DNA是RNA 循環(huán)了40次,標準樣品都沒CT值,10個待測樣品,只有兩個有CT值 該實驗重復了一點,結(jié)果類似 我用同樣的引物,用沒稀釋的標準DNA和待測DNA,做個常規(guī)PCR,跑膠結(jié)果顯示目標DNA是擴增了的。 real-time PCR 儀器是:Stratagene Mx3000 可能原因是? |
金蟲 (著名寫手)
銅蟲 (小有名氣)
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