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mch502金蟲 (小有名氣)
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SDS-PAGE蛋白質(zhì)電泳，電泳遷移率只與分子量相關(guān)嗎？
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請(qǐng)問各位，SDS-PAGE蛋白質(zhì)電泳中電泳遷移率只與分子量相關(guān)嗎？ 我的試驗(yàn)中對(duì)牛血清白蛋白（BSA）進(jìn)行改性，用乙二胺與BSA上面的羧基(-COOH)反應(yīng)，讓BSA只帶有氨基(-NH2)，同時(shí)BSA的分子量會(huì)增大。已經(jīng)用化學(xué)法測(cè)得改性后的BSA游離氨基數(shù)目，最近做SDS-PAGE鑒定蛋白質(zhì)時(shí)，不止一次發(fā)現(xiàn)分子量大的改造后的BSA條帶反倒是比原始BSA向前遷移的距離多，Maker顯示分子量還比未改造的BSA低。本實(shí)驗(yàn)室的另一同學(xué)也得出相同的相反結(jié)果。請(qǐng)問，這一現(xiàn)象怎么解釋啊？ |
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Rubisco580
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
mch502: 金幣+1, ★有幫助, 謝謝。我們的想法也一樣。 2012-04-17 11:55:12
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SDS-PAGE的原理是SDS（帶負(fù)電）和蛋白按照固定的比例結(jié)合，并將蛋白完全變性。樓主的實(shí)驗(yàn)中，乙二胺是不是帶了負(fù)電荷？這樣似的蛋白比原蛋白帶了更多的負(fù)電荷而分子量增加并不多，結(jié)果就是在電場(chǎng)中遷移的更快。 對(duì)樓主的實(shí)驗(yàn)不熟悉，純屬個(gè)人想法，有錯(cuò)誤請(qǐng)指正。 |
2樓2012-04-09 11:27:37
5樓2012-04-10 20:36:10
DA_huyang
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9樓2012-04-17 22:08:35
3樓2012-04-09 21:48:51
mssj300130
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4樓2012-04-10 13:22:32
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
mch502: 金幣+1, 好的 謝謝！ 2012-04-17 11:58:38
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6樓2012-04-11 12:18:17
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7樓2012-04-17 22:02:10
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8樓2012-04-17 22:06:52
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10樓2012-04-18 10:58:03
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