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[交流]
避免可溶性寡聚體的形成 已有1人參與
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| 包涵體復(fù)性過(guò)程中經(jīng)常蛋白聚集反應(yīng)而沉淀，而我做的幾個(gè)蛋白在復(fù)性過(guò)程中也發(fā)生了聚集反應(yīng)，不過(guò)形成了穩(wěn)定的可溶性的寡聚體。這個(gè)可溶的寡聚體可以掛上Ni柱，但不能吸附在離子交換樹(shù)脂上。為了避免可溶性寡聚體的形成，已經(jīng)嘗試了添加分子聚集抑制劑（如L-Arg、甘油等）、緩慢降低變性劑濃度（連續(xù)梯度方法如反向稀釋和連續(xù)透析）、人工分子伴侶復(fù)性系統(tǒng)、柱復(fù)性、極端pH方法及這幾種方法的組合等，最后結(jié)果還是蛋白聚集反應(yīng)很頑強(qiáng)。在此與大家交流一下還有什么好的方法或者建議。謝謝！ |
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2樓2012-04-16 12:43:32
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