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[求助]
氨基酸在線(xiàn)衍生測(cè)定過(guò)程中遇到的一些問(wèn)題
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用的是Agilent 1100在線(xiàn)衍生測(cè)定氨基酸。對(duì)于液相的使用還不是很熟，希望蟲(chóng)友們給我些解決辦法。 1 測(cè)定過(guò)程中壓力變化大，基線(xiàn)漂移嚴(yán)重。用的是梯度洗脫。流動(dòng)相為A： 40mM磷酸鹽緩沖溶液；B： 乙腈:甲醇:水(45:45:10，V/V/V)。咨詢(xún)安捷倫，說(shuō)可能是磷酸鹽緩沖液引起的，如果是的話(huà)，我該如何改色譜條件？ 2 重現(xiàn)性不好，同一標(biāo)樣，相同條件下測(cè)出兩種譜圖。如何解決這個(gè)問(wèn)題？ 洗脫梯度 壓力變化 基線(xiàn)變化 標(biāo)樣譜圖 |
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3樓2012-04-10 23:27:56
guevara1967
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
小彩84: 金幣+3, ★★★很有幫助, O(∩_∩)O謝謝 2012-04-10 23:28:24
lihongyan424: 金幣+2, 謝專(zhuān)家，辛苦了。 2012-04-11 08:14:09
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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lihongyan424: 金幣+2, 謝專(zhuān)家，辛苦了。 2012-04-11 08:14:09
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關(guān)于壓力： 我覺(jué)得壓力變化沒(méi)有問(wèn)題，你是梯度洗脫，壓力變動(dòng)屬于正常范圍，壓力只是隨著梯度在變化，本身壓力幅度并不大 關(guān)于基線(xiàn)： 因?yàn)槟愕奶荻仁菑?00%磷酸鹽緩沖液相到90%有機(jī)相，基線(xiàn)變動(dòng)是略大些，我以為也可以接受，畢竟梯度在這擺著呢 關(guān)于梯度： 你用的什么柱子，梯度一定要從100%磷酸鹽緩沖液開(kāi)始嗎，能不能含有1-3%的有機(jī)相，這樣對(duì)柱子和液相系統(tǒng)來(lái)說(shuō)都好些，另外柱后平衡，從23.2到26min，似乎時(shí)間短了些，建議延長(zhǎng)時(shí)間，以獲得好的重現(xiàn)性 |
2樓2012-04-10 22:46:50
4樓2012-04-11 10:26:56
guevara1967
鐵桿木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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5樓2012-04-11 10:41:45
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