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密碼子插入的引物設(shè)計(jì)問題
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改造pET22b載體，現(xiàn)在信號(hào)肽中加入一個(gè)K，請(qǐng)問如何設(shè)計(jì)插入突變引物？ 如果是單純的氨基酸置換突變的引物設(shè)計(jì)，比較容易設(shè)計(jì)，用overlap 但是插入突變呢？如果在引物中添加了3個(gè)額外的堿基，額外加入的堿基下游的其他原本基因上的堿基，在退火過程中還能與模板結(jié)合嗎？ 請(qǐng)指教 |
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