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1樓 2012-04-13 13:41:49

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xxnly

金蟲 (小有名氣)

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【答案】應(yīng)助回帖

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1. 加入瓊脂后一定要煮沸一下，然后再進(jìn)行其他處理。你在配制的過(guò)程中沒(méi)有煮沸，瓊脂不是一個(gè)均勻的狀態(tài)。如果按照你之前的方法，你容器底部那些培養(yǎng)基凝固度應(yīng)該比較高�；蛘邔⑴囵B(yǎng)基搖勻后再到平板，效果會(huì)好一些。
2. 隔夜培養(yǎng)之后如果澄清的話，我認(rèn)為可以考慮再培養(yǎng)1到2d看看，因?yàn)榫暝诒鋬?nèi)放置太久，生長(zhǎng)速度可能會(huì)減慢。
3. 滅菌的時(shí)候只開紫外，紫外可以殺菌，產(chǎn)生的臭氧也可以殺菌，殺菌結(jié)束后就需要開風(fēng)了。

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啊！我要畢業(yè)了……天！賜我一份工作吧！

9樓2012-04-28 18:43:58

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mizhoulong

木蟲 (著名寫手)

環(huán)境衛(wèi)生、微生物學(xué)

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【答案】應(yīng)助回帖

★ ★
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zhang8826857: 金幣+2, good 2012-04-16 23:07:44

沒(méi)做過(guò)甘油菌這個(gè)菌種，但是大多數(shù)的菌種基本都是這樣操作的。

如果培養(yǎng)基中沒(méi)有添加緩沖液，最好還是測(cè)試下pH。

1.5g瓊脂足夠了，凝固度不高？會(huì)不會(huì)你太心急了，放在培養(yǎng)箱中過(guò)夜再用試試，同時(shí)可以判斷有沒(méi)有污染。

建議復(fù)蘇的時(shí)候用TSB肉湯和TSA瓊脂同時(shí)進(jìn)行。

不太清楚這個(gè)無(wú)菌操作臺(tái)，現(xiàn)在弄微生物都用生物安全柜，像你這種情況就用前照紫外（關(guān)閉通風(fēng)），用時(shí)當(dāng)然不能開紫外了，不開通風(fēng)，點(diǎn)酒精燈，在火焰附近操作。

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回復(fù)此樓

環(huán)境衛(wèi)生、微生物學(xué)、衛(wèi)生應(yīng)急

2樓2012-04-16 10:51:35

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雷楊琴

木蟲 (小有名氣)

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zhang8826857: 金幣+3, good 2012-04-16 23:07:53

你這實(shí)驗(yàn)做得太開放了。（1）甘油保存菌可以保存一年左右，但期間不能反復(fù)凍融，會(huì)對(duì)其造成巨大的傷害，活性會(huì)隨著你反復(fù)凍融的次數(shù)呈指數(shù)級(jí)下降；建議最好一次多保存幾管；（2）LB液體最好不要放太久了，現(xiàn)用現(xiàn)配滅菌最好；（3）紫外滅菌？？紫外的穿透力很弱的，看有文獻(xiàn)報(bào)道說(shuō)隔了一層很薄的玻璃紫外都不能穿透，因此紫外滅菌僅能用于物體表面滅菌。（4）基本操作：將LB液體培養(yǎng)基、接種環(huán)、酒精燈放在超凈工作臺(tái)上，紫外滅菌半個(gè)小時(shí)，不開通風(fēng)；再將帶菌平板放入，用酒精棉球擦拭手，晾干后點(diǎn)燃酒精燈；將接種環(huán)燒紅，特別是接口處要多燒一下；等其冷卻幾十秒后挑取單個(gè)菌落接種于液體培養(yǎng)基中，整個(gè)過(guò)程平板最好不要離火焰10cm外，完后同樣要燒灼接種環(huán)；怎么拿平板需要你師兄或師姐教一下，多拿空平板試幾次就熟練了。實(shí)驗(yàn)都是最基礎(chǔ)的，慢慢就好了，孰能生巧！繼續(xù)努力！

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3樓2012-04-16 20:11:30

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Joicesidy

新蟲 (小有名氣)

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甘油保存菌種應(yīng)該在零下70攝氏度保存，估計(jì)是你的菌種不行了

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4樓2012-04-17 10:18:07

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