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kabuqinuo89新蟲 (小有名氣)
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[求助]
TA克隆為什么總是假陽性啊？ 已有1人參與
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我這一陣在做TA克隆，切膠回收的片段條帶很清晰，但是每次連接都是假陽性或者是連不上，這是什么原因呢，求助��！ 切膠回收后的條帶 第二個(gè)孔為目的條帶，后面為菌落PCR結(jié)果，求解 |
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
kabuqinuo89: 金幣+1 2012-04-19 18:24:25
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
kabuqinuo89: 金幣+1 2012-04-19 18:24:25
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1. 請(qǐng)樓主閱讀使用Taq酶的說明書，看是否加A。 2.連接T的體系中PCR產(chǎn)物的濃度很重要，回收后要檢測(cè)在再用。 3.檢測(cè)手段的問題，擴(kuò)不出菌液PCR可以懷疑引物的問題，體系的問題，因?yàn)闆]有對(duì)照�？梢詫⒖寺u起來提質(zhì)粒，看大小，或者酶切，都可以驗(yàn)證是否連接成功。 4.其他操作按照說明書操作即可，同時(shí)確定藥品都沒有問題。 |
34樓2012-04-19 18:20:24
zhang8826857
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2樓2012-04-16 18:18:52
kabuqinuo89
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3樓2012-04-16 21:30:43
zhang8826857
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4樓2012-04-16 22:57:26
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