成龍

如果你想觀察的是細胞間的物質(zhì)，而且是出于菌落中的，那你不需要用confocal,可以看看用多糖的染料或特異性的蛋白質(zhì)的染料染色后，用解剖鏡或正置看看。confocal一般是倒置的，要求你必須做片子，而你的材料用一壓，一定就變形了�？床坏侥闼枰木錉顟B(tài)下細胞-細胞間的物質(zhì)的分布和豐度。

另外，你要考慮染料或者探針的問題。PS，為什么不直接分離呢？

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致良知

4樓2012-04-18 10:01:16

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yushenye

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【答案】應助回帖

★
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zhang8826857: 金幣+1, 歡迎交流^_^ 2012-05-26 23:22:24

如果看單個菌細胞，可以不做切片，培養(yǎng)后直接固定，透化，染色
如果看菌落之間的和單個細胞的東西，那得要像普通的免疫組化一樣做

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Intheway,Onmyway

5樓2012-04-19 09:34:13

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成龍

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引用回帖:

5樓: Originally posted by yushenye at 2012-04-19 09:34:13:
如果看單個菌細胞，可以不做切片，培養(yǎng)后直接固定，透化，染色
如果看菌落之間的和單個細胞的東西，那得要像普通的免疫組化一樣做

我想觀察水處理中微生物生物膜的物質(zhì)分布，大概膜厚大幾十到一百個微米，通過染色觀察蛋白質(zhì)，多糖這些分布情況，微生物生長在載玻片上形成生物膜。其實想做切片的目的是我怕生物膜比較厚的話下層物質(zhì)很難被探針標記到，我主要是想通過觀察得到物質(zhì)分布的三維結構，通過構建生物膜的一個立體的結構，得到他的空隙分布情況。針對我這種情況，您能給我一個從取樣到上鏡一系列過程的參考嗎？多謝啦！我不是學這方面的，只是想得到分布結果所以前面的不得不去做，還請您多耐心的幫助.

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6樓2012-04-19 15:53:49

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desertgrow

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樓主找到方法了嗎？
我做與你相關的，也在找方法，我覺得應該固定一下，不然跟有蟲友說的用蓋玻片一蓋生物膜就被壓了結構就破壞了
另外怎么能看到三維結構呢？

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7樓2012-05-08 10:59:06

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8樓: Originally posted by jiacunzhen at 2012-05-26 22:19:00
濕態(tài)直接染色就行，完了用封片液封片，再用樹膠封一下保存就行，很簡單

謝謝

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9樓2012-05-26 22:20:18

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yushenye

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【答案】應助回帖

引用回帖:

6樓: Originally posted by 成龍 at 2012-04-19 15:53:49
我想觀察水處理中微生物生物膜的物質(zhì)分布，大概膜厚大幾十到一百個微米，通過染色觀察蛋白質(zhì)，多糖這些分布情況，微生物生長在載玻片上形成生物膜。其實想做切片的目的是我怕生物膜比較厚的話下層物質(zhì)很難被探針標 ...

呵呵，其實你以“細菌”“生物膜”“免疫熒光”來搜索英文文獻，應該可以找到，試試吧，
不行再問我

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10樓2012-06-11 14:30:47

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