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高效液相色譜測定植物內(nèi)源激素含量----內(nèi)源激素固相萃取問題 已有1人參與
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各位大蝦！ 我最近也準(zhǔn)備用HPLC測植物內(nèi)源激素（IAA、GA3、ABA和ZT）的，查了文獻，固相萃取中有些地方不懂啊，希望指教啊！ 陳善波《早蜜梨果實發(fā)育期間內(nèi)源激素與細(xì)胞壁酶活性變化的研究》（見附圖1和附件），這篇文獻中有提到用“Supelclean C18小柱”，但是我查了一下supelco產(chǎn)品中有“ Supelclean LC-18固相萃取小柱”和“ Supelclea ENVI-18固相萃取小柱”兩種（前者------1.多點鍵合，十八烷基(17%含碳量)，封尾 2.極好地凈化，提取和濃縮環(huán)境水樣中的污染物 3.較高的含碳量也能更大的耐受苛刻的pH條件 4.用于從水溶液中萃取非極性到中等極性的分析物；后者----相覆蓋率和碳含量高于LC-18，有很強的耐酸堿性，對非極性化合物有較高的容量，反相萃取，適合于非極性到中等極性的化合物）。到底是用的哪個哦？哪個“LC”和“ENVI”是什么意思��？ 而且《早……》文獻中提到，“將上清液緩慢過C18小柱后，流出液倒入培養(yǎng)皿中，……”，為什么和其它的資料中“要先用純甲醇活化C18小柱，超純水平衡，然后上樣，超純水淋洗，再50%甲醇洗脫，合并洗脫液”的過程不一樣；好像《早……》中直接過小柱就得到激素提純液了，而不是先淋洗除掉干擾雜質(zhì)，再用極性溶劑洗脫得到激素提純液。 再有C18小柱是反相柱，如果將80%甲醇提取的激素(IAA、GA3、ABA和ZT應(yīng)該是極性分子吧？)過C18小柱，那么應(yīng)該是激素隨甲醇一起流出，而其它非極性或中等極性分子保留在吸附劑中嗎？這樣是不是陳《早……》中的操作就解釋的通了呢？ 糾結(jié)啊，給作者和廠家聯(lián)系了都沒給我回應(yīng)，在此請教各位大俠啦，謝謝謝先�。。。。�！ 附圖1 |
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2012-04-17 18:12:46, 3.93 M
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