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[求助] 磷酸緩沖液

請(qǐng)問(wèn)磷酸緩沖液pH值3---10的配制方法是什么，謝謝！

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1樓 2012-04-19 15:22:54

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【答案】應(yīng)助回帖

★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
zhongyuxian: 金幣+1, ★有幫助, 謝謝，請(qǐng)問(wèn)還有其他的么 2012-04-19 22:40:31
sweety: 回帖置頂 2012-04-20 10:35:48

如圖

磷酸鹽緩沖液配制

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太胖了！~

2樓2012-04-19 21:24:29

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sweety: 金幣+1, 鼓勵(lì)新蟲(chóng)參與交流 2012-04-20 10:36:01
zhongyuxian: 回帖置頂 2012-04-20 18:04:10

其實(shí)我這個(gè)一直在用，你不用知道具體的配比你只要參考一個(gè)大概的范圍，當(dāng)你配的PH是5 偏酸加磷酸氫二鈉片堿加檸檬酸很好弄的

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&amp;amp;amp;amp;quot;Hope&amp;amp;amp;amp;quot;and&amp;amp;amp;amp;quot;Wait&amp;amp;amp;amp;quot;

4樓2012-04-20 09:10:16

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引用回帖:

2樓: Originally posted by hsd3521 at 2012-04-19 21:24:29:
如圖
24/f9/592019_1334841849_805.jpg
磷酸鹽緩沖液配制

謝謝，請(qǐng)問(wèn)還有其他pH值的么

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3樓2012-04-19 22:41:47

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4樓: Originally posted by acast at 2012-04-20 09:10:16:
其實(shí)我這個(gè)一直在用，你不用知道具體的配比你只要參考一個(gè)大概的范圍，當(dāng)你配的PH是5 偏酸加磷酸氫二鈉片堿加檸檬酸很好弄的

好的，謝謝你

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5樓2012-04-20 10:24:52

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http://www.bioinformatics.org/JaMBW/5/4/index.html
可以計(jì)算常用緩沖液的配置用量

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6樓2012-04-20 11:06:43

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http://www.gaoyang168.com/bbs/viewthread.php?tid=634092 可參照下這個(gè)

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7樓2012-04-20 17:06:13

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8樓2012-04-20 18:05:18

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有現(xiàn)成的你去買(mǎi)來(lái)溶解就行自己配麻煩成本也不是很低

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even

9樓2012-04-21 20:19:30

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磷酸鹽緩沖液（PBS）配制方法
0.01M PBS

PBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4，pH 7.2)
PBS緩沖液（pH7.2～7.4）：NaCl 137mmol/L，KCl 2.7mmol/L，Na2HPO4 4.3mmol/L， KH2PO4 1.4mmol/L

稱(chēng)7.9g NaCl，0.2g KCl，0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和1.8g K2HPO4，溶于800 ml 蒸餾水中，用HCl調(diào)節(jié)溶液的pH值至7.4，最后加蒸餾水定容至1 L。保存于4℃冰箱中即可。

需要注意的是，通常所說(shuō)的濃度0.01 M 指的是緩沖溶液中所有的磷酸根濃度，而非Na 離子或K 離子的濃度，Na 離子和K 離子只是用來(lái)調(diào)節(jié)滲透壓的。
母液的配制：
0.2M Na2HPO4：稱(chēng)取 71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于 1000ml 水
0.2M NaH2PO4：稱(chēng)取 31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水
各種濃度PB(pH=7.4)的配制：
先配 0.2M PB (pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4， 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。
然后只需將0.2M PB (pH=7.4)按相應(yīng)比例適當(dāng)稀釋即可，如：
0.1M PB（PH=7.4）：取 500ml 0.2M PB，加水稀釋至 1000ml 即可。
0.01M PB （PH=7.4）：取50ml 0.2M PB，加水稀釋至 1000ml 即可。
0.02M PB （PH=7.4）：取100ml 0.2 M PB，加水稀釋至 1000ml 即可。
若需要 NaCl的話(huà)，加入 NaCl 至0.9%（g/100ml）即可。
另：其它各種另 PH值的 0.2M PB（100ml)配方：
pH    0.2M NaH2PO4（ml）       0.2M Na2HPO4（ml）
5.7          93.5                         6.5
5.8          92                            8
5.9          90                            10
6.0          87.7                         12.3
6.1          85                            15
6.2          81.5                         18.5
6.3          77.5                         22.5
6.4          73.5                         26.5
6.5          68.5                         31.5
6.6          62.5                         37.5
6.7          56.5                         43.5
6.8          51                         49
6.9             45                         55
7.0             38                         62
7.1             33                         67
7.2          28                         72
7.3             23                         77
7.4             19ml                      81ml
7.5             16                         84
7.6             13                         87
7.7          10.5                         90.5
7.8             8.5                         91.5
7.9          7                            93
8.0          5.3                         94.7

0.01M 磷酸鹽緩沖液（PBS）配制方法

稱(chēng)取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸餾水中，用HCl調(diào)節(jié)溶液的pH值至7.4，最后加蒸餾水定容至1L即可。在15lbf/in2(1034×105Pa)高壓下蒸氣滅菌（至少20分鐘），保存存于室溫或4℃冰箱中。

需要注意的是，通常所說(shuō)的濃度0.01M 指的是緩沖溶液中所有的磷酸根濃度，而非Na 離子或K 離子的濃度，Na 離子和K 離子只是用來(lái)調(diào)節(jié)滲透壓的。如果是用于免疫組化的話(huà)，則需要在配置的時(shí)候分別加入100 u/ml青霉素和鏈霉素之后再調(diào)PH、定容、滅菌消毒。
PH          7.6    7.4       7.2       7.0
H2O    1000    1000    1000    1000
NaCl       8.5    8.5       8.5       8.5
Na2HPO4 2.2    2.2    2.2       2.2
NaH2PO4 0.1    0.2    0.3       0.4
根據(jù)經(jīng)驗(yàn)來(lái)看，新鮮配置的PBS攪勻后其PH值約在7.2-7.4之間，可是在溫度的影響下，尤其在夏天，其電離常數(shù)發(fā)生了改變，在經(jīng)過(guò)晝夜的時(shí)間后，PH值會(huì)明顯改變（我親自測(cè)過(guò)偏酸）。所以做實(shí)驗(yàn)的同學(xué)可要注意了，PH值可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，甚至可能導(dǎo)致陰性。所以務(wù)必記得這個(gè)時(shí)候和天氣，要加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)條件控制問(wèn)題。每次使用前最好用試紙測(cè)一下過(guò)夜了的PBS，如果發(fā)生偏酸或偏堿，注意重新?lián)Q新液。

PBS緩沖液
稱(chēng)取NaCl 8g，KCl 0.2g，Na2HPO4?12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g，溶于900ml雙蒸水中，用鹽酸調(diào)pH值至7.4，加水定容至1L，常溫保存?zhèn)溆谩?br /> PBST緩沖液
取300μl Tween-20 加入PBS 100ml中，混勻后即刻使用�，F(xiàn)用現(xiàn)配。
如果是把所有固體加大十倍，配置為濃縮液，工作時(shí)候十倍稀釋?zhuān)敲�，在剛配好濃縮液時(shí)，PH在6.5左右，明顯偏酸。不能用鹽酸調(diào)。雖然可以用氫氧化鈉顆粒調(diào)，但是有更方便的方法。
十倍稀釋以后，PH自動(dòng)升高到所需要的值。不需要其它任何處理。這個(gè)可以先取少量試一試，配好之后再測(cè)一次~

PH8.0的PBS配方詳細(xì)
1. NaCl 137mmol/L，KCl 2.7mmol/L，Na2HPO4 4.3mmol/L， KH2PO4 1.4mmol/L

2. 向燒杯中加入約800 ml的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?br />
3. 滴加濃鹽酸將pH值調(diào)節(jié)至8.0，然后加入去離子水將溶液定容至1 L。

4. 高溫高壓滅菌后，室溫保存。

注意：上述PBS Buffer中無(wú)二價(jià)陽(yáng)離子，如需要，可在配方中補(bǔ)充1 mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。

0.05mol/L PBS(磷酸緩沖液Phosphate Buffer Solution，PBS)的配制：

甲液：0.05mol/L Na2HPO4溶液：稱(chēng)取磷酸氫二鈉9.465g 7.099g,加蒸餾水至1000ml ;
乙液：0.05mol/L KH2P04溶液: 稱(chēng)取磷酸二氫鉀, 9.07g 6.803g,加蒸餾水至1000m1。
將甲乙液分裝在棕色瓶?jī)?nèi)，于4℃冰箱中保存，用時(shí)甲、乙兩液各按不同比例混合，即可得所需pH的緩沖液,見(jiàn)下表:

pH 甲液ml 乙液mI
5.29 2.5    97.5
5.59 5.0    95.0
5.91 10.0    90.0
6.24 20.0    80.0
6.47 30.0    70.0
6.64 40.0    60.0
6.81 50.0    50.0
6.98 60.0    40.0
7.17 70.0    30.0
7.38 80.0    20.0
7.73 90.0    10.0
8.04 95.0    5.0
你要配制pH=6.8的PBS，可用甲、乙液各50ml混合即可。

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10樓2012-04-23 14:52:27

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[考研] 調(diào)劑 +4	柚柚yoyo 2026-03-26	4/200	2026-03-26 20:43 by fmesaito
[考研] 【雙一流院校新能源、環(huán)境材料，材料加工與模擬招收大量調(diào)劑】 +4	Higraduate 2026-03-22	8/400	2026-03-26 20:34 by Higraduate
[考研] 材料考研求調(diào)劑 +3	Dendel 2026-03-23	6/300	2026-03-26 17:51 by fmesaito
[考研] 081700 調(diào)劑 267分 +11	迷人的哈哈 2026-03-23	11/550	2026-03-26 15:41 by zzll406
[考研] 281求調(diào)劑 +6	Koxui 2026-03-24	7/350	2026-03-26 15:37 by 無(wú)際的草原
[考研] 考研一志愿蘇州大學(xué)初始315（英一）求調(diào)劑 +3	sbdksD 2026-03-24	4/200	2026-03-25 18:16 by xcjcqu
[考研] 各位老師您好：本人初試372分 +5	jj涌77 2026-03-25	6/300	2026-03-25 14:15 by mapenggao
[考研] 0854電子信息求調(diào)劑 +7	α____ 2026-03-22	9/450	2026-03-25 13:37 by α____
[考研] 0854人工智能方向招收調(diào)劑 +4	章小魚(yú)567 2026-03-24	4/200	2026-03-25 13:29 by 2177681040
[考研] 化學(xué)調(diào)劑 +6	yzysaa 2026-03-21	6/300	2026-03-25 09:27 by aa331100
[考研] 318求調(diào)劑 +5	plum李子 2026-03-21	8/400	2026-03-25 09:26 by aa331100
[考研] 求調(diào)劑院校信息 +6	CX 330 2026-03-21	6/300	2026-03-22 15:25 by 無(wú)懈可擊111