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sks803

金蟲(chóng) (小有名氣)

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膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎（Collagen-induced arthritis，CIA）是目前公認(rèn)的RA的最佳動(dòng)物模型，特別是在治療機(jī)制及免疫反應(yīng)有關(guān)的研究中，CIA模型的優(yōu)點(diǎn)將為研究者提供極大幫助，因此我們選用Ⅱ型膠原免疫作為制作RA動(dòng)物模型的載體因素。在長(zhǎng)期的研究中，我們課題組對(duì)CIA模型制作積累了豐富的經(jīng)驗(yàn)，目前在CIA模型的制作方面處于國(guó)內(nèi)領(lǐng)先水平。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，CIA大鼠免疫10d起相繼出現(xiàn)踝關(guān)節(jié)腫脹，行動(dòng)遲緩、跛行；光鏡下觀察發(fā)現(xiàn)CIA大鼠踝關(guān)節(jié)有明顯的滑膜組織增生，滑膜細(xì)胞增生呈的乳頭狀，滑膜組織內(nèi)見(jiàn)有擴(kuò)張的血管及新生毛細(xì)血管及成纖維細(xì)胞，并伴有淋巴細(xì)胞侵潤(rùn)。各關(guān)節(jié)軟骨的基質(zhì)及軟骨細(xì)胞出現(xiàn)不同程度的退行性，嚴(yán)重處軟骨壞死剝脫，變性、壞死剝脫的軟骨表面，可見(jiàn)由滑膜細(xì)胞和毛細(xì)血管增生所形成的血管翳，血管翳侵襲到軟骨下，可見(jiàn)不同程度的骨破壞；膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)可見(jiàn)滑膜組織增生，血管翳形成，關(guān)節(jié)軟骨見(jiàn)有不同程度的退行性變及骨質(zhì)的破壞；并且與正常對(duì)照組大鼠相比，大鼠血漿抗Ⅱ型膠原抗體、IL-6、IL-10及IFN-γ等炎癥因子的水平明顯升高，從而反映本實(shí)驗(yàn)制作的CIA模型的可靠性，能夠滿足RA模型的要求。
RA屬中醫(yī)學(xué)“痹證”范疇，許多研究表明脾虛與RA的中醫(yī)病機(jī)、臨床表現(xiàn)亦密切相關(guān)。中醫(yī)理論認(rèn)為脾胃虛弱，飲食失調(diào)，起居失常，可致痰濕內(nèi)生，濕濁為患，復(fù)感外邪而致痹，如《素問(wèn)•痹論篇第四十三》指出：“飲食居處為其病本�！泵鞔t(yī)家汪蘊(yùn)谷在《雜癥會(huì)心錄•痹論》中強(qiáng)調(diào)補(bǔ)脾土的重要性。從脾論治作亦是中醫(yī)藥治療RA的重要法則，不但取得了明顯的臨床療效，而且具有一定的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)[8-9]，故又有人提出“脾虛是痹證的發(fā)病之本”[10]。辨證論治，是中醫(yī)認(rèn)識(shí)疾病和治療疾病的基本原則，是中醫(yī)學(xué)對(duì)疾病的一種特殊的研究和處理方法，也是中醫(yī)臨床的基本特點(diǎn)。而CIA模型是沒(méi)有聯(lián)系中醫(yī)病因病機(jī)學(xué)說(shuō)的動(dòng)物疾病模型，在探索中醫(yī)辨證論治及評(píng)價(jià)中藥療效的等問(wèn)題上存在一定的局限性。目前對(duì)于脾虛證RA動(dòng)物模型的制作與評(píng)價(jià)研究工作開(kāi)展的較少，而這部分研究工作對(duì)中醫(yī)證候等方面或有突破作用，在中醫(yī)藥治療類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎療效研究的評(píng)價(jià)或具有重要的作用，因此我們開(kāi)展此方面的研究。
目前有多種制作脾虛動(dòng)物模型的方法，如：用瀉下法、飲食失節(jié)法、耗氣破氣法、勞倦過(guò)度法、過(guò)勞加饑飽失常法、勞倦過(guò)度加飲食不節(jié)法、利血平法等多種方法制作脾虛動(dòng)物模型[4,11-14]。在眾多脾虛造模的方法中，利血平塑造脾虛證模型出現(xiàn)的各種虛弱癥狀與臨床脾虛癥狀十分相似，且具有條件易控制、模型較穩(wěn)定之特點(diǎn)，是制備脾虛模型的經(jīng)典方法之一。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用利血平制作的脾虛證CIA動(dòng)物模型，除關(guān)節(jié)明顯紅腫外，且出現(xiàn)與臨床脾虛證RA相似的改變，具體表現(xiàn)在：（1）動(dòng)物行為學(xué)特征：大鼠精神萎靡，瞇眼，被毛枯疏無(wú)光澤，弓背蜷縮，踝關(guān)節(jié)紅腫，倦怠、懶動(dòng)，喜聚堆，飲食減少，體重下降，稀便等癥狀，十分接近中醫(yī)脾虛證的癥狀特點(diǎn)，可以作為脾虛證的模型加以使用和研究。（2）現(xiàn)代檢測(cè)指標(biāo)印證：①利血平制作的脾虛證CIA大鼠小腸絨毛排列紊亂，數(shù)量減少，長(zhǎng)短、寬窄不一，被覆上皮可見(jiàn)有多量杯狀細(xì)胞，腸腔內(nèi)可見(jiàn)多量剝脫、退變、壞死的絨毛碎片。壞死組織內(nèi)見(jiàn)有炎細(xì)胞浸潤(rùn)，腸腔內(nèi)可見(jiàn)剝脫；②與正常對(duì)照組相比，ConA刺激下CIA組大鼠T細(xì)胞增殖能力和LPS刺激后B細(xì)胞增殖能較明顯升高，說(shuō)明CIA大鼠細(xì)胞免疫與體液免疫明顯增強(qiáng)。利血平CIA組大鼠T細(xì)胞和B細(xì)胞功能功能較CIA大鼠明顯下降，雖無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可能是由于利血平（脾虛）雖可引起免疫功能的下降，但并不能對(duì)抗這種免疫功能亢進(jìn)的狀態(tài)；③CIA組大鼠外周血中CD3+細(xì)胞、CD4+細(xì)胞、CD8+細(xì)胞百分比與正常對(duì)照組相比，無(wú)顯著性差異，但CD4/CD8明顯升高；與CIA組相比，利血平CIA組CD3+細(xì)胞、CD4+細(xì)胞明顯下降，CD8+細(xì)胞百分比和CD4/CD8無(wú)明顯變化，可能是由于CIA大鼠機(jī)體處于免疫功能的亢進(jìn)狀態(tài)，利血平（脾虛）雖可引起免疫功能的下降，但亦不能調(diào)整這種免疫功能亢進(jìn)的狀態(tài)。這些均與脾虛證特異性病理變化相符合，說(shuō)明在此CIA大鼠中存在一定的脾虛狀態(tài)。除此之外，我們還檢測(cè)了RA的相關(guān)指標(biāo)，結(jié)果顯示：脾虛證CIA大鼠與對(duì)照CIA大鼠相比，關(guān)節(jié)腫脹度與關(guān)節(jié)病理?yè)p傷程度加重，抗Ⅱ型膠原抗體、IL-10水平升高，這些指標(biāo)的改變，從一定程度上表明脾虛能加重RA的發(fā)生發(fā)展，在RA的發(fā)生發(fā)展中起著重要的作用，這與中醫(yī)理論與臨床觀察相符合。
本課題組對(duì)利血平制作的脾虛動(dòng)物模型，已經(jīng)有一定的研究基礎(chǔ)[4,15-17]，發(fā)現(xiàn)用利血平制作脾虛動(dòng)物模型，動(dòng)物出現(xiàn)了利血平CIA組大鼠精神萎靡，瞇眼，被毛枯疏無(wú)光澤，弓背蜷縮，倦怠、懶動(dòng)，喜聚堆，食欲下降，體重下降，稀便等癥狀，十分接近中醫(yī)脾虛證的癥狀特點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果與其相一致，說(shuō)明利血平方法制作的脾虛動(dòng)物模型穩(wěn)定性較好。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，采用利血平方法制作的脾虛證RA動(dòng)物模型，既有明顯的脾虛癥狀，又有明顯的RA特征，說(shuō)明這種脾虛證RA病證結(jié)合模型，能夠部份反映脾虛證RA病人的發(fā)病特點(diǎn)，具有可行性，利血平法制作的脾虛證CIA大鼠模型可以為RA脾虛證病證結(jié)合動(dòng)物模型提供一個(gè)有益的參考。
本文中所論及的采用不同方法制作的脾虛證的RA病證結(jié)合動(dòng)物模型，是結(jié)合現(xiàn)代研究成果，并在中醫(yī)理論指導(dǎo)下而提出來(lái)的，肯定存在不足之處，要造出理想的中醫(yī)病證結(jié)合動(dòng)物模型，得到學(xué)界的公認(rèn)，目前還有很大的難度。希望能本研究能對(duì)CIA病證結(jié)合動(dòng)物模型的研究及中醫(yī)治療方法、治療機(jī)理的深入探討，起到拋磚引玉的作用。

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1樓 2012-04-22 15:30:35

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jeangong

木蟲(chóng)之王 (文學(xué)泰斗)

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【答案】應(yīng)助回帖

★
Mally89: 金幣+1 2012-05-07 16:56:16

Collagen-induced arthritis (Collagen-induced arthritis, the CIA) is now recognized as the best animal models of RA, especially in the treatment mechanism and the immune response, the CIA model has the advantage will provide researchers with a great help,Therefore, we selected the type II collagen immunization as a carrier of factors of production of RA animal models. Long-term study of our group on the CIA model-making has accumulated a wealth of experience in the domestic leading level in the production of the CIA model. The results suggest that have appeared in the CIA rat immune 10d ankle swelling, slow, limp; light microscope CIA rat ankle joint synovial tissue, synovial cell hyperplasia were papillary, slip the membrane see the expansion of blood vessels and new blood capillaries and fibroblasts, accompanied by lymphocyte infiltration. Of the articular cartilage matrix and cartilage cells with varying degrees of degenerative exfoliative serious at the cartilage necrosis, degeneration and necrosis of the exfoliative the cartilage surface, showing that formed by the synovial cells and capillary proliferation, pannus, pannus invasion into subchondral visible to varying degrees of bone destruction; knee joint cavities in synovial tissue hyperplasia, pannus formation, articular cartilage degeneration and bone destruction see there are different degrees; and compared with normal control rats, rats plasma anti-type II collagen antibody, IL-6, IL-10 and IFN-γ and other inflammatory factor levels were significantly increased, to reflect the reliability of the CIA model produced in this experiment, to meet the requirements of the RA model.

太長(zhǎng)了，太費(fèi)時(shí)了�。�！先翻譯到這里。

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2樓2012-04-24 14:24:50

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