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zzzjjj1986木蟲 (小有名氣)
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[求助]
DNA與一個染料連接后如何鑒定？
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求助！我用一條單鏈DNA氨基修飾后，與實驗室自制的染料（帶羧基），用EDC/NHS反應(yīng)體系，想把單鏈DNA和染料連接上。跑高效硅膠板，出現(xiàn)了新的點，但是用變性聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測的時候，我的產(chǎn)物條帶和對照組（氨基修飾的DNA)沒有明顯的區(qū)別。 1、染料是先溶于DMF里面，EDC/NHS活化，點板檢測活化成功后，用TE稀釋，加入DNA-NH2。避光室溫反應(yīng)。點板檢測出現(xiàn)新點。 2、跑單鏈DNA的變性聚丙烯胺凝膠電泳的原理是什么？我的理想化是分子量不同跑的速度不同，電荷有沒有影響？里面有DMF有沒有影響？ 3、還有沒有其他方法可以鑒定兩者連接上？ 請教！�。�！求助！�。�！一直在這個問題上止步��！ |
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4樓2012-04-25 23:24:45
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2. 核酸（RNA）的凈電荷取決于介質(zhì)的H+濃度或與其它大分子的相互作用， 然后在電場作用下朝相反電極運動~ 離子的離子霧中的擴散雙電層，離子尺寸越大、溶液中的離子強度越高時，電泳現(xiàn)象變得越明顯。 DMF本身不帶電，溶于H+的溶液后，其中的酰胺基會與H+結(jié)合，可能會有影響 |
6樓2012-04-26 11:34:13
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