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[求助]
共聚焦顯微鏡和熒光顯微鏡區(qū)別
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| 我看文獻中描述，在觀察一種熒光染料進入細胞的情況時，先用DAPI染了細胞核，用熒光顯微鏡觀察完還要用共聚焦顯微鏡觀察，有區(qū)別嗎？我怎么覺得用熒光顯微鏡就可以了啊，細胞核藍色，熒光染料紅色，在細胞質(zhì)中，看的很明顯啊，為啥還要用共聚焦顯微鏡啊？ |
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
zhaohq1209: 金幣+3, BioEPI+1, 歡迎專業(yè)的蟲友經(jīng)常來交流哈` 2012-04-29 09:45:05
落雪含香: 金幣+5, ★★★★★最佳答案, 太棒了，我覺得您解決我一大難題，謝謝您！ 2012-05-01 12:52:28
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落雪含香: 金幣+5, ★★★★★最佳答案, 太棒了，我覺得您解決我一大難題，謝謝您！ 2012-05-01 12:52:28
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兩者的區(qū)別有點象醫(yī)院照X光和做CT。 事實上激光共聚焦是熒光顯微鏡的升級版。傳統(tǒng)熒光顯微鏡是用汞燈或氘燈照射整個樣品平面，再進行觀察或用CCD設(shè)備拍得圖像。由于聚焦平面上下的平面上也有熒光被激發(fā)，因此結(jié)果圖像會被干擾，同時目標樣品區(qū)域同一平面上其他部分的熒光也可能干擾觀察結(jié)果。激光共聚焦顯微鏡用激光光源在樣品上逐點成像解決這個問題，因此其成像更加清晰。此外，激光共聚焦顯微鏡分辨率有提高（使用特殊光源如紫外光），還可以逐層掃描三維成像，利用多通道采集圖像的功能同時獲取不同光譜段的熒光信號獲得疊層圖像。 對于DAPI染色，用熒光顯微鏡就可以獲得結(jié)果，有文章同時用兩種方法，我估計是由于激光共聚焦設(shè)備配備成本較高，沒有熒光顯微鏡普遍，因此在使用熒光顯微鏡獲得結(jié)果的情況下再用共聚焦獲得高質(zhì)量圖片。 |
2樓2012-04-29 04:26:39
清泉
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