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[交流] 新手請(qǐng)教分離黃酮

分離新手，想請(qǐng)教一各位怎么分離黃酮單體。已經(jīng)有70%左右的總黃酮，水溶性不好，用甲醇可以溶掉，設(shè)備有硅膠、聚酰胺、中壓制備、ODS。
應(yīng)該如何下手，要先用硅膠或聚酰胺粗分幾段，如果要分成幾段，是按照極性分段？然后上中壓制備嗎？

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1樓 2012-05-07 10:50:39

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shihao611

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2樓2012-05-07 11:28:47

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vivid2008

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首先一點(diǎn)：含量已經(jīng)在70%左右，這個(gè)含量你是怎么測(cè)得的？
聚酰胺主要是官能團(tuán)富集黃酮類化合物，對(duì)分段沒(méi)有明顯的作用。
可以通過(guò)大小不同的硅膠柱再分分段，然后上中壓制備，然后再液相制備等。

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6樓2012-05-07 14:50:56

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我習(xí)慣先用硅膠柱分段，正反相硅膠，后上凝膠，最后做制備HPLC

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7樓2012-05-07 15:33:54

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6樓: Originally posted by vivid2008 at 2012-05-07 14:50:56:
首先一點(diǎn)：含量已經(jīng)在70%左右，這個(gè)含量你是怎么測(cè)得的？
聚酰胺主要是官能團(tuán)富集黃酮類化合物，對(duì)分段沒(méi)有明顯的作用。
可以通過(guò)大小不同的硅膠柱再分分段，然后上中壓制備，然后再液相制備等。

硝酸鋁顯色，紫外測(cè)吸光度測(cè)得的含量，大小不同的硅膠柱是什么意思？

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8樓2012-05-07 16:57:34

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7樓: Originally posted by xionghui at 2012-05-07 15:33:54:
我習(xí)慣先用硅膠柱分段，正反相硅膠，后上凝膠，最后做制備HPLC

按照什么分段?

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9樓2012-05-07 17:02:10

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9樓: Originally posted by slshihao at 2012-05-07 17:02:10:
按照什么分段?

不同比例流動(dòng)相點(diǎn)薄層板，顯色后根據(jù)分離度砍段

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10樓2012-05-07 17:40:02

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8樓: Originally posted by slshihao at 2012-05-07 16:57:34:
硝酸鋁顯色，紫外測(cè)吸光度測(cè)得的含量，大小不同的硅膠柱是什么意思？

就是用不同的硅膠目數(shù)上不同的徑高比柱子，用不同的流動(dòng)相比例或系統(tǒng)進(jìn)行砍段

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11樓2012-05-07 17:42:45

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syhorchid

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建議先用聚酰胺進(jìn)行粗分！

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12樓2012-05-07 17:56:13

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linxi5925

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祝福樓主。。。。。。。。

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14樓2012-05-07 18:21:08

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ninujuki

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17樓2012-05-07 20:50:35

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wxykf

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很多柱材料都能分開(kāi)的，讓你導(dǎo)師多告訴你幾個(gè)方法

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18樓2012-05-07 21:11:33

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17樓: Originally posted by ninujuki at 2012-05-07 20:50:35:
你說(shuō)的這幾種填料作用都不同，看你想怎么分了，按極性的話就主要用硅膠柱分，凝膠柱是按分子大小分離的。其實(shí)聚酰胺對(duì)黃酮的分離效果是很好的，你可以先用聚酰胺粗分，然后再根據(jù)情況用凝膠或硅膠。因?yàn)楣枘z有死吸 ...

實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有凝膠，可以聚酰胺粗分然后用ODS分嗎

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19樓2012-05-08 08:51:28

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vivid2008

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8樓: Originally posted by slshihao at 2012-05-07 16:57:34:
硝酸鋁顯色，紫外測(cè)吸光度測(cè)得的含量，大小不同的硅膠柱是什么意思？

就是大小粗細(xì)不一樣的硅膠柱呀。不過(guò)更建議用聚酰胺富集后再用凝膠柱除下雜，然后再上中壓制備和制備液相

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20樓2012-05-08 09:24:38

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20樓: Originally posted by vivid2008 at 2012-05-08 09:24:38:
就是大小粗細(xì)不一樣的硅膠柱呀。不過(guò)更建議用聚酰胺富集后再用凝膠柱除下雜，然后再上中壓制備和制備液相

謝謝了，我也想先用過(guò)聚酰胺的，但是用什么洗脫劑比較好，甲醇水梯度洗嗎

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21樓2012-05-08 09:41:40

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21樓: Originally posted by slshihao at 2012-05-08 09:41:40:
謝謝了，我也想先用過(guò)聚酰胺的，但是用什么洗脫劑比較好，甲醇水梯度洗嗎

用乙醇水梯度洗脫

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22樓2012-05-08 15:06:58

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xionghui

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9樓: Originally posted by slshihao at 2012-05-07 17:02:10:
按照什么分段?

點(diǎn)板，看薄層再分段，一定要成點(diǎn)才好合并分段。不是黃酮苷應(yīng)該好成點(diǎn)

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23樓2012-05-08 19:14:59

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22樓: Originally posted by vivid2008 at 2012-05-08 15:06:58:
用乙醇水梯度洗脫

為什么用乙醇水呢，還有梯度一般應(yīng)該怎么設(shè)，要在之前點(diǎn)板確定嗎

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24樓2012-05-09 12:26:46

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meteord

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聚酰胺富集，乙醇洗脫，可以自設(shè)梯度，我之前富集用過(guò)60%的。

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25樓2012-05-09 13:33:04

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簡(jiǎn)單回復(fù)

sesame_oil3樓

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祝福

skymao0074樓

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