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hebauzjy金蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
柱子出問(wèn)題，請(qǐng)問(wèn)是什么問(wèn)題，怎么解決，謝謝
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| 之前有人在waters液相用了高濃度磷酸做流動(dòng)相，之后我的柱子柱效不太好了，后來(lái)又有人用了高濃度鹽，我的柱子的柱壓很高，請(qǐng)問(wèn)是什么問(wèn)題，怎么解決，謝謝 |
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6樓2012-05-10 13:56:28
谷牛牛
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【答案】應(yīng)助回帖
★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
豆哥: 金幣+1, 謝謝參與交流 2012-05-10 18:05:49
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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一般在用磷酸鹽作為高效液相的流動(dòng)相時(shí)，很容易出現(xiàn)在進(jìn)樣后樣品與蛋白出現(xiàn)共沉淀的情況，特別是磷酸緩沖鹽不要超過(guò)50mml/L,PH不要超過(guò)10 ！一般的液相系統(tǒng)都有預(yù)柱，不會(huì)在柱子里邊，若出現(xiàn)柱壓升高，那就是溶解性的蛋白質(zhì)吸附在柱子表面，一般很難沖洗干凈，先用甲醇-水的流動(dòng)相洗柱子，再用乙腈來(lái)沖洗！ |
7樓2012-05-10 15:46:01
谷牛牛
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
karl2100: 金幣+1, 謝謝！ 2012-05-13 00:06:34
hebauzjy: 金幣+1, ★★★很有幫助 2012-05-14 13:24:42
karl2100: 金幣+1, 謝謝！ 2012-05-13 00:06:34
hebauzjy: 金幣+1, ★★★很有幫助 2012-05-14 13:24:42
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若不是預(yù)柱問(wèn)題，就有點(diǎn)麻煩了了。其實(shí)進(jìn)中藥的提取液本來(lái)就會(huì)有很多大分子的化合物，就會(huì)吸附在柱子表面，第二在使用高濃度磷酸緩沖也做流動(dòng)相的時(shí)候，柱床容易出現(xiàn)溶解的情況，特別是，若你的柱子是一般的，較便宜的柱子，而且老柱子用過(guò)一段時(shí)間的，柱子老化的情況就會(huì)加重。乙酸銨會(huì)破壞柱床，不宜長(zhǎng)時(shí)間使用！ |
25樓2012-05-12 00:01:07
anyluk
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10樓2012-05-10 19:31:03
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