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求大家?guī)兔χ赋鑫覍嶒炦^程中的不恰當?shù)胤? 已有1人參與
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我是想做一個硅膠層析柱分離凈化的加標回收實驗，要看洗脫劑對樣品回收的影響，分析物是弱極性的 。 （一）我的樣品的標準溶液是用甲醇配的，20ppb。我的樣品處理后是Hex作為溶劑的，所以我取了0.5ml的標準液于塑料試管，然后我用氮吹吹干，之后加1mlHex復溶，用渦旋混勻器渦旋1min混均，放在旁邊待用。 （二 ）硅膠層析柱自填：（1）硅膠失活（之前做好的）：10g硅膠加入0.5g蒸餾水于研缽中混均，密封過夜使用。 （2)稱取4g5%水的硅膠加入到15mlHex的小燒杯中，玻璃棒攪拌均勻。然后濕法裝柱的，裝柱前柱子加了10mlHex,自由沉降后加1cm無水硫酸鈉然后用雙鏈球壓實，上樣前多跑了兩個個柱體積的Hex，等到快到無水硫酸鈉層時上樣，然后用DCM洗脫。 （三）收集好洗脫液后旋蒸近干，然后轉(zhuǎn)移到一次性試管，氮吹干，之后加入0.5ml甲醇復溶，渦旋混勻器渦旋1min混均，轉(zhuǎn)移到進樣品，然后液質(zhì)檢測。 出現(xiàn)問題：（1）硅膠柱洗脫時跑著跑著就開裂了，感覺對回收率是不是有影響呢？ （2）上樣時，我用的是一次性吸管上樣的，但是每次都把無水硫酸鈉沖成了斜面，不知道這對回收率會不會有影響呢？ （3）做了好幾次回收率不是很高就是基本回收不回來，很不穩(wěn)定，不知道哪出來問題，我在想是不是硅膠失活那步混合不均勻呢？大家知不知道硅膠失活這步的具體方法呢，我是自己摸索的。 問題比較多，希望有人能幫幫忙解決下。 |
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2樓2022-01-05 20:52:30
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