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污泥懸濁液離心后細(xì)菌在上層嗎菌懸液呢

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2樓2012-05-21 08:42:30

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跟離心速度和細(xì)菌的自身特性有關(guān)，一般超過(guò)3000rpm，大部分細(xì)菌隨污泥沉降于下層。但有些有莢膜的細(xì)菌比較難沉降，需要較高的離心力。

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3樓2012-05-21 09:27:12

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污泥懸濁液離心后細(xì)菌在中層，上面是水，中間是菌，下面是污泥，離心最好在12000-14000之間。

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4樓2012-05-21 11:12:48

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4樓: Originally posted by 寶杰羅生物 at 2012-05-21 11:12:48:
污泥懸濁液離心后細(xì)菌在中層，上面是水，中間是菌，下面是污泥，離心最好在12000-14000之間。

分三層？難道過(guò)渡層是菌？會(huì)隨上清液被倒出嗎？如果轉(zhuǎn)速?zèng)]有那么高比如3000呢？

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5樓2012-05-21 11:32:22

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3樓: Originally posted by robert-RBT at 2012-05-21 09:27:12:
跟離心速度和細(xì)菌的自身特性有關(guān)，一般超過(guò)3000rpm，大部分細(xì)菌隨污泥沉降于下層。但有些有莢膜的細(xì)菌比較難沉降，需要較高的離心力。

我記得用ctab法提取dna時(shí)，第一次8000rpm離心后取的是上清液，為什么呢？

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6樓2012-05-21 11:35:58

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6樓: Originally posted by ohnygod at 2012-05-21 11:35:58:
我記得用ctab法提取dna時(shí)，第一次8000rpm離心后取的是上清液，為什么呢？

Janssen法提取土壤DNA就是懸浮土壤3200rpm分離，菌在上清，不過(guò)沉淀要多洗幾次才能把結(jié)合的菌盡量洗出來(lái)，這個(gè)過(guò)程損失9/10左右的菌。

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7樓2012-05-21 15:52:36

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6樓: Originally posted by ohnygod at 2012-05-21 11:35:58:
我記得用ctab法提取dna時(shí)，第一次8000rpm離心后取的是上清液，為什么呢？

CTAB那次離心是已經(jīng)破壁，DNA釋放到清夜中了

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8樓2012-05-21 15:57:58

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細(xì)胞裂解之前是收集沉淀，裂解以后是收集上清液。這里有一篇參考文獻(xiàn)，只是方法不同。中國(guó)生物工程雜志２００８，２８（７）：９７～９
本人做的不是環(huán)境微生物，沒(méi)有實(shí)踐過(guò)。理論應(yīng)該是這樣。

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9樓2012-05-21 16:02:59

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把上清液倒掉，菌就在上層了，離心速度在12000-14000.

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10樓2012-05-22 09:40:19

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