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fridayalicia新蟲 (初入文壇)
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[求助]
求助 MTT�。�！
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俺第一次做MTT 出現(xiàn)了很囧的問題 HepG2細胞 設(shè)立 陰性對照、 梯度濃度的利福平、 紅霉素組 培養(yǎng)24h后 陰性對照的數(shù)據(jù)居然顯著低于所有給藥組 啥情況啊? 怎么會給藥反而促進細胞生長了呢？ 另外之前看帖說最好吸光值在0.1-0.7之間 我測出來的所有值都在1.0-1.7之間啊 是細胞長得太密了么 還是什么原因？ 求各位大俠出手相助 小女子萬分感激��！ 補充：藥是用DMSO溶的 給藥組和對照組都含0.1%的DMSO 另外我是把配好的5mg/ml的MTT先加到培養(yǎng)基中稀釋十倍，然后再給到每個孔的 這樣和每孔先各給20ul 5mg/ml的MTT 再補180ul的培養(yǎng)基 有區(qū)別么？ [ Last edited by fridayalicia on 2012-5-21 at 10:57 ] |
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fridayalicia
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3樓2012-05-21 12:04:40
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2樓2012-05-21 11:15:15
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
zhaohq1209: 金幣+1, 鼓勵一下撒 2012-05-22 22:30:36
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zhaohq1209: 金幣+1, 鼓勵一下撒 2012-05-22 22:30:36
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陰性對照就是只加培養(yǎng)基不加藥的是吧？這個就太奇怪了 首先不是DMSO的問題，0.5%的DMSO我都做過，沒有什么毒性 10000cell/mL也應(yīng)該沒有問題，那我只能考慮是不是種板的時候你空白的那一行種稀了，實在是想不出更好的解釋 MTT不建議你那么加，倒不是說哪里有問題，我是沒見過這么混著加的，你還是直接加吧 至于吸光度的問題，一般加藥孔不應(yīng)該過1，你要是覺得大了就早點加藥，不要等細胞長得太滿 總之，給你的意見就是，接著做唄，什么實驗都不會一次成功的，尤其是細胞實驗。祝LZ好運 |
4樓2012-05-22 09:32:43
5樓2012-05-22 17:05:37
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