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什么是熒光壽命?為什么要測熒光壽命?測熒光壽命時應該注意些什么?
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什么是熒光壽命?為什么要測熒光壽命?測熒光壽命時應該注意些什么? |
至尊木蟲 (職業(yè)作家)
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利用熒光壽命、量子產(chǎn)率等參數(shù)可以研究生物大分子中的能量轉移現(xiàn)象:通過該現(xiàn)象的研究,可以獲得生物大分子內(nèi)部的許多信息,如分子內(nèi)兩基因之間的臨界距離可根據(jù)弗爾斯特公式來測定,弗爾斯特公式如(6)式所示: 即是兩熒光發(fā)色團之間的能量傳遞的速率KDA和它們之間的臨界距離Ro的六次方成反比。式中的KDA、K、J等均可由熒光壽命、量子產(chǎn)率及熒光強度的測定來推算,從而可以得知兩基團之間的距離。 以往人們常用熒光偏振做指標來研究生物大分子動力學。近年來人們趨于用熒光偏振隨時間的衰減來研究這些問題。在這種方法中,激發(fā)光不是一連續(xù)的 面偏振光 ,而是一偏振的光脈沖,因此測得的F∥和F是在兩個不同方向上偏振的熒光隨時間的衰減,它既和熒光壽命τ有關,又與分子在溶液中的運動有關,因此常表示為F∥(t)和 F⊥(t)。由它們可得一相當重要的物理量——各向異性 參數(shù)A(t)。 由A(t)可推測生物大分子的形狀、分子轉動弛豫時間(即從一個定向的狀態(tài)到一個無定向狀態(tài)所要的時間),進而可以推知生物大分子的大小、分子在溶液中的轉動角度和時間之間的函數(shù)關系。由這些結果可以研究分子之間的相互作用 、分子間結合的緊密程度、蛋白質(zhì)、核酸分子的解聚程度等等。 |

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