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zwjbeijing鐵桿木蟲(chóng) (正式寫手)
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[求助]
pLenti6.3-IRES2-EGFP/V5 DEST 慢病毒表達(dá)體系原理
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最近老板在公司讓別人包裝慢病毒，篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株，用的是pLenti6.3-IRES2-EGFP/V5 DEST載體，想請(qǐng)教大俠們 這個(gè)實(shí)驗(yàn)的具體原理（附帶質(zhì)粒圖譜）： attR1 和attR2是干什么用的？ 包裝成病毒，還需要什么樣的質(zhì)粒？ 病毒里面的遺傳物質(zhì)RNA，是pLenti6.3-IRES2-EGFP/V5 DEST載體的那一部分？ 在感染宿主細(xì)胞的時(shí)候，是通過(guò)什么位點(diǎn)或者機(jī)制整合到染色體上的？ 先謝謝大俠們了 我找了好久了都沒(méi)有搞定，給一篇介紹的文獻(xiàn)也可以的 ~~~~(>_<  ~~~~  |
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zwjbeijing
鐵桿木蟲(chóng) (正式寫手)
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2樓2012-05-28 23:20:59
yqbter
至尊木蟲(chóng) (正式寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
zwjbeijing: 金幣+20, ★★★很有幫助 2012-05-29 22:33:15
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zwjbeijing: 金幣+20, ★★★很有幫助 2012-05-29 22:33:15
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它不是attR而是attB。是Gateway系統(tǒng)的識(shí)別序列。可以方便的替換兩個(gè)attB之間的序列，而不用考慮酶切位點(diǎn)之類的麻煩事。見(jiàn)維基：http://en.wikipedia.org/wiki/Gateway_Technology7 i- `5 G; m: {6 Q 包成病毒還要pLP1、pLP2、pLP/VSVG 見(jiàn)http://www.stemcell8.cn/thread-52928-1-1.html 6 M( k. y" L. c% N/ ~" R# a7 m是從5‘LTR到3’LTR中間這一段。 6 R* q/ R: p2 _1 D4 V7 M- d機(jī)制不知道。, ^# j8 |
3樓2012-05-29 10:16:19
4樓2012-05-29 12:22:37
zwjbeijing
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5樓2012-05-29 22:53:00
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