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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 化學化工區(qū) » 分析 » 甲醇 ，乙腈的洗脫能力
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jensin銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
甲醇 ，乙腈的洗脫能力
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| 各位大俠：早上好！我想請問一下我用30%甲醇-水流動相可以做出結(jié)果，為什么用乙腈不行呢？乙腈應該用多少比例呢？謝謝 |
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MJF628
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2樓2012-06-09 10:13:48
xbqewpq
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魂兮
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【答案】應助回帖
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jensin: 金幣+1, 謝謝 2012-06-10 08:16:33
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雖然在反相中乙腈洗衣脫比甲醇強，但用甲醇能分離的樣品，乙腈可能就不行。這和比例也沒多大關系。比較一下乙腈和甲醇的區(qū)別。 1、首先，乙腈價格高 乙腈，特別是HPLC級的價格很高，但是，文獻或LC廠家所示的條件，多用乙腈，這是為什么呢？現(xiàn)就此談談。 2、 吸光度。 乙腈HPLC級的小。乙腈和甲醇的市銷HPLC級和優(yōu)級的吸收光譜中，乙腈HPLC吸收最�。ㄌ貏e是在短波長上�。�。所謂HPLC級是除 去具有吸收UV的雜質(zhì)，在規(guī)定的波長上吸光度限制在規(guī)格值以內(nèi)。在UV檢測時，產(chǎn)生的噪聲小，因此在進行UV短波長上的高靈敏度分析時乙腈HPLC級最適 宜。另外，在UV檢測中的梯度基線上也是乙腈HPLC級產(chǎn)生鬼峰少，雖然，其他與水相溶性高的有機溶劑有各種各樣，但很難能找到比乙腈HPLC級吸收更小 的。另外，甲醇的HPLC級和優(yōu)級，雖然所得的光譜相差不大，但是優(yōu)級不能保證吸光度，有可能產(chǎn)生偏差，價格也相差不大，所以盡量使用HPLC級。 3、 壓力。 乙腈低，柱內(nèi)承受的壓力，根據(jù)有機溶劑的種類或混合比率的不同而異，水/乙腈，水/甲醇混合液的比率與輸液壓力的關系中,甲醇與水混合，壓 力增高，而乙腈同樣與水混合且并不如此。所以，乙腈一方，在同樣的流速下不在柱內(nèi)加上多余的壓力。從上述兩項，可以確認使用乙腈的意義，那么，甲醇除了價 格以外，還有沒有其化優(yōu)點呢? 4、洗脫能力。 一般而言，乙腈較強。乙腈和甲醇分別用同樣的比率與水混合時，一般情況下，乙腈的洗 脫能力強。特別是混合比率低時，從咖啡因和苯酚的洗脫來看，獲得同樣的保留時間，乙腈的比率，只需甲醇的比率的一半以下即可。另一方面，有機溶劑100% 或與此極接近時，從胡蘿卜素和膽甾醇來看，常常都是甲醇的洗脫能力強。混合比在50比1等較為特殊時，調(diào)制的誤差大，影響保留時間，或平衡化的時間長，乙 腈遇到這種情況時，用甲醇的10比1混合代替乙腈，這樣操作方便些。溶劑受溫度影響時，不采用容器定量，而采用重量的方法(考慮比重)，可使混合比的誤差 減小。 5、分離(洗脫)的選擇性。 兩者的差異，乙腈和甲醇在分離的選擇性上不同。由于有機溶劑分子的化學性質(zhì)(甲醇和乙醇是質(zhì)子 性，乙腈和四氫呋喃是非質(zhì)子性)不同所致。因此，在用乙腈類不能獲得分離的選擇性，就試用甲醇類看看。 6、峰形。 用時出現(xiàn)差異。 像水楊酸化合物(在鄰位上具有羧基或甲氧基的苯酚化合物)等，用乙腈類時拖尾大，用甲醇類可抑制�？墒�，一般情況下，聚合物類反相柱，與硅膠柱相比，更具 有峰形寬的傾向，特別是用聚苯乙烯分析柱芳香族化合物等時常見。這在流動相是甲醇時非常顯著，而用乙腈時不明顯。為此，用聚合物類反相用柱時建議采用后者 (乙腈類)，這是因為乙腈使凝膠膨潤。 7、流動相的脫氣，乙腈類要注意。 混合溶劑的置制，不說在LC裝置內(nèi)，只談預先在流動相瓶 內(nèi)進行時，(等濃度系統(tǒng))。甲醇與水混合時發(fā)熱，多余的溶解空氣較易變?yōu)槊摮鰵馀?脫氣容易)。而乙腈由于吸熱冷卻，隨著慢慢回到室溫，產(chǎn)生氣泡，所以要 考慮脫氣(加溫攪拌，過濾膜，He脫氣等)。 |
3樓2012-06-09 11:05:36
4樓2012-06-20 10:06:02
yugijiang
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