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Rafael007金蟲 (小有名氣)
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[求助]
請教各位大蟲uplc峰型的問題，謝謝
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各位大蟲門大家好，小蟲現(xiàn)在有一色譜條件的問題請教大家，對于大家的幫助先在此謝過，每位回復(fù)的蟲友我都會相應(yīng)的贈送金幣，謝謝。 問題是這樣的，我最近在做幾種二萜生物堿的分析，用的是uplc來做的，根據(jù)文獻(xiàn)上的相關(guān)報道，選用的流動相是乙腈—10mmol/L碳酸氫銨（加氨水調(diào)至ph=10.5）溶液，選用的色譜柱是uplc的耐堿柱BEH C18，但是最后跑下來的結(jié)果是有些峰前延嚴(yán)重，峰型較差，下圖中標(biāo)的1號峰峰型還好，就是后面的五個峰型較差，想在此向大家請教這是什么原因，如何改善，要是都能像1號峰峰型就好了。謝謝大家。 圖一是混標(biāo)的色譜圖，只有峰一峰型比較好，后面幾個峰如何才能像峰一那樣。 圖二是混標(biāo)和單標(biāo)的對比圖，放大之后，其他峰的峰型明顯不好，基線也不平，如何調(diào)整呢。 這是圖一，混標(biāo)，只有峰一較好，其他的幾個峰型都比較差 這是圖二，混標(biāo)和單標(biāo)的對比圖，單標(biāo)放大后，峰型特別丑，而且基線特別的不平，我用的溶劑是二氯甲烷 [ Last edited by Rafael007 on 2012-6-9 at 16:33 ] |
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Rafael007: 金幣+2, ★★★很有幫助 2012-06-12 14:23:45
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1、首先回答你二氯甲烷的問題 二氯甲烷和反相的水不互溶，當(dāng)二氯甲烷帶著樣品進(jìn)入色譜系統(tǒng)的時候，不能很好的和流動相互溶，導(dǎo)致樣品不能和色譜柱發(fā)生正常的分配作用，出來的峰有可能不是正態(tài)分布。還有一點：二氯甲烷會損傷C4,8,18這樣的色譜柱。 2,、再說運(yùn)行時間的問題，大多數(shù)情況下（分離，峰形，定量可接受），運(yùn)行時間要根據(jù)色譜峰的k值來定，k值在2-10左右的運(yùn)行時間是最合適的。 k= （保留時間-死時間）/死時間 希望能幫到你 |
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Rafael00718樓2012-06-12 11:21:50
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soundhorizo: 金幣+2, 感謝應(yīng)助 歡迎常來分析版交流指導(dǎo)^^ 2012-06-10 20:51:50
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基線應(yīng)該沒問題，看圖二，有兩個波動都能重現(xiàn)，這沒問題。第四個峰確實不太好，看看理論板數(shù)是多少，如果達(dá)到最低板數(shù)要求，應(yīng)該就合格了。 也可以調(diào)下PH，看是不是PH影響的。 再不行就要換柱子。 |
2樓2012-06-09 17:52:39
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