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wyt102金蟲(chóng) (小有名氣)
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果蔬汁中淀粉含量的快速測(cè)定方法是什么？
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cck0318
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【答案】應(yīng)助回帖
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可溶性糖及淀粉測(cè)定 一、試劑 1. 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液：稱取0.100g無(wú)水葡萄糖溶于蒸餾水中，定容至1000ml每毫升溶液含葡萄糖100μg 2. 硫酸－蒽酮試劑：稱取0.2g蒽酮和1g硫脲（阻氧化劑）放入燒杯中，緩緩加入100ml濃硫酸，邊加邊攪拌。溶解后呈黃色透明溶液，貯于棕色瓶中，最好使用當(dāng)天配制，貯于冰箱內(nèi)約可使用兩周。 3. 9.2N高氯酸：78.87ml HclO4稀釋至100ml； 4. 4.6N高氯酸：35ml 9.2N HclO4稀釋至70ml。 二、方法 1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 加入蒽酮試劑時(shí)，最好將各管放在冷水中，并沿管壁緩緩加入，待全部加完后，再混勻。將以上標(biāo)準(zhǔn)管和樣品管同時(shí)在100℃水浴中加熱10min，取出自來(lái)水冷卻，以空白作參比，在620nm波長(zhǎng)下測(cè)其光密度，以光密度為縱坐標(biāo)，以糖含量為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并求出標(biāo)準(zhǔn)線性方程。 2. 可溶性糖的提取 稱取1g樣品，加5ml 80％乙醇，研磨成勻漿，80℃水浴中浸提10min，冷卻，離心5min，重復(fù)浸提一次，離心5min合并以上離心后的上清液于25ml溶量瓶，用80％乙醇定容至刻度，沉淀備用測(cè)定淀粉。 3. 顯色測(cè)定 吸取樣品提取液0.1ml，加1.9ml蒸餾水，再沿管壁緩緩加5ml硫酸－蒽酮試劑，待全部加完后混勻，在100℃水浴中加熱10min，在100℃水浴中加熱10min，以不加樣液管為對(duì)照，在620nm波長(zhǎng)下測(cè)其光密度。 4. 計(jì)算 可溶性糖含量（％）＝｛［查標(biāo)準(zhǔn)曲線（μg）×（樣品液總體積／顯色用樣液體積）×稀釋倍數(shù)］／樣品（g）｝×100 5. 還原糖含量測(cè)定：取0.5ml稀釋液（1ml提取液稀釋至10ml），加入1.5ml蒸餾水，1.5ml 3，5-二硝基水楊酸，混勻，沸水浴5min，冷水冷卻，定容至25ml，用（53WB UV/VIS）分光光度計(jì)于520測(cè)定OD值。 6. 淀粉的提取 沉淀加水2ml，沸水浴糊化15min,冷卻后加9.2N高氯酸2ml，不時(shí)攪拌15min后加水2ml離心，上清液倒入50ml溶量瓶中，沉淀加2ml4.6N高氯酸，不時(shí)攪拌15min后加水3ml離心10min，上清液倒入50ml溶量瓶中，沉淀再加4ml水,離心10min,合并上清液并用蒸餾水定容。 用測(cè)定可溶性糖的方法測(cè)定之。淀粉含量的計(jì)算也同上。 |
2樓2012-06-18 15:13:31
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3樓2012-06-18 15:15:01
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4樓2012-12-21 17:11:30
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