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求交流關(guān)節(jié)軟骨各種切片的詳細(xì)步驟
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| 如題,剛?cè)∠玛P(guān)節(jié)軟骨,正泡在PFA,想做冰凍切片和石蠟切片,但不知道需不需要先脫鈣?有哪些地方需要注意的,好多文獻(xiàn)里面都沒說這么詳細(xì)的。 |
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沒弄過軟骨的,只弄過股骨的(小鼠),僅供參考。。 對(duì)于骨的可以脫也可以不脫,我問過李凌衡他說脫得效果會(huì)更好,但要買一個(gè)universal block ,要不背景會(huì)高,非特異強(qiáng) 。 不脫鈣的,刀不好買,要特殊的刀,可能會(huì)更好的還原最初形態(tài)。 脫鈣的有快速慢速之分,你上網(wǎng)查一個(gè),配點(diǎn),脫脫就行 我的脫鈣的實(shí)驗(yàn)方案 1) 小鼠股骨4% 多聚甲醛包被3天, 4℃ 2) 4℃ 14% EDTA 脫鈣, 3-5 天 (每隔 24 h 換一次14% EDTA) 3) PBS洗 2 h 4) 浸入含30% 蔗糖的PBS溶液中,4℃ 過夜 5) OCT 包埋 6) 用恒冷切片機(jī)切片,厚度約10µm(這個(gè)薄點(diǎn)也可以),并干燥(保持避光) 至于軟骨,你去病理啊什么地方試試,可能不用脫鈣就能切的 |

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