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張香玲1017鐵桿木蟲 (著名寫手)
冷夜雨
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[求助]
發(fā)酵問題，望大蝦們不惜賜教
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本人是做生物轉化實驗的，現(xiàn)在遇到一難題想不明白，特向大家求助： 為了減少成本問題，將培養(yǎng)基中的底物減少一半，其它成分不變，培養(yǎng)條件完全一樣，菌種還是原來用的菌種，轉化率是上去了，轉化時間也比原來縮短了一半，這就滿足了老板的需求。我想問的問題是：為什么轉化時間能縮短這么多，PH值也提前升高，氨基氮比原來也提前升了。這是菌種自身問題還是跟培養(yǎng)基有關？ 望大蝦們不惜賜教！謝謝 |
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【答案】應助回帖
感謝參與，應助指數(shù) +1
張香玲1017: 回帖置頂 2012-06-15 08:27:39
張香玲1017: 回帖置頂 2012-06-15 08:27:39
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可能兩種原因： 1.樓主所用底物對該菌所產(chǎn)酶具有較大的抑制作用，樓主應該做濃度梯度，或許底物濃度提高到一定濃度，相同的時間仍然可以達到同樣的轉化率，豈不是更好。 2.底物對細胞的代謝有一定的抑制作用，我想樓主直接在培養(yǎng)基中做轉化，可能的原因是該轉化是氧化還原反應，需要足夠的輔酶和能量，因此細胞必須保持足夠的代謝活性。若底物濃度過高，抑制了細胞的活性，雖然酶活在，但缺乏輔酶和ATP做支持，轉化難以維系。 若是這樣，建議樓主可采用底物分批添加（前體是產(chǎn)物對酶活沒有抑制作用），同時流加部分碳源和氮源，確保細胞活力。 |
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張香玲101715樓2012-06-12 17:20:03
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3樓2012-06-12 11:12:50
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【答案】應助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應助指數(shù) +1
張香玲1017: 金幣+5 2012-06-12 11:34:36
感謝參與，應助指數(shù) +1
張香玲1017: 金幣+5 2012-06-12 11:34:36
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原來培養(yǎng)基底物濃度偏高也不是沒可能的，菌體內各種代謝需要平衡，轉化產(chǎn)物和代謝廢物濃度高了也會抑制轉化酶系，底物濃度高了也會，你有沒監(jiān)控過轉化過程中菌濃的變化？ 培養(yǎng)基成分是可以做正交優(yōu)化的，優(yōu)化的因子里可以設計濃度，反應pH，時間等，優(yōu)化效果以轉化率或到達特定轉化率的時間來衡量，不過做起來就辛苦了，pH變化這么大分析原因了。 菌種轉化中發(fā)生馴化作用也難講，效果做的好的菌最好另外保證一份啊，方便和原始出發(fā)菌株做個對照就知道菌株是否發(fā)生變異了 |
5樓2012-06-12 11:19:04
張香玲1017
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