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472263516新蟲 (小有名氣)
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[求助]
硅膠柱可否一直使用？
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我需要將油脂分為中性脂肪和糖脂和磷脂，洗脫溶劑分別為氯仿，丙酮和甲醇。 請問：1、裝好一個45*600的硅膠柱（60-100目）后，我是將油是直接倒入柱子然后洗脫還是將先將油溶解在氯仿里，然后洗脫？如果溶解在氯仿里比例是多少？ 2、每一次油上樣量大概多少？用多少溶劑才能洗脫完全？ 3、因為磷脂含量極低，我需要一定的量，一次洗脫的量可能不夠，是否可以用同一根柱子不換硅膠第二次甚至第三次加樣洗脫回收？ 謝謝！ |
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llrock926
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2樓2012-06-13 17:34:20
reasong
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3樓2012-06-14 10:21:53
472263516
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感謝幫助，我還有幾個問題，希望能得到你的幫助。 我的目的是將提取的油分為中性脂肪和極性脂肪，中性脂肪用氯仿洗脫，極性用甲醇洗脫，分別回收后下一步試驗。 1你建議油用少量氯仿溶解？少量是多少，大概比例多少？ 2什么時候上樣？是洗脫液離硅膠面1-2cm高時還是洗脫液剛好完全進入液面時上樣？ 3我看到有人建議說為了不把柱子表面沖壞，建議在表層加無水硫酸鈉或者海沙，那么請問什么時候加，怎么加，加的時候難道不怕把柱子沖壞嗎？加的高度是多少？ 4最頭疼的一個問題是如何判斷中性脂肪或者極性脂肪已經(jīng)完全被洗脫下來了？做TLC需要標樣吧，可是中性脂肪和極性脂肪是個混合物。 期待回復(fù)！ |
4樓2012-06-15 17:12:17
常晨暉
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5樓2013-06-27 07:50:55
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