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偶呀伊

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[求助] 測低分子量GPC的具體步驟和方法

想要測分子量大概為3k~5k之間的一些聚合物樣品：
1.怎么選擇聚苯乙烯標(biāo)樣來做標(biāo)準(zhǔn)曲線，比如從多少分子量選到多少分子量，各配成多大的濃度？進樣量多少為宜？進樣針是普通液相的進樣針就可以嗎？有無平頭尖頭之分？是否只要測量標(biāo)曲范圍內(nèi)的樣品共用一條標(biāo)曲就可以？
2.進樣前后要怎么沖柱子，用THF就可以嗎？要沖多長時間？
3.樣品要處理成多大濃度？進樣量大概多少？
4.操作要注意一些什么問題？

本人是新手，對GPC了解甚少，請各位大俠多多指教，小女子不勝感激！
希望對我?guī)柼柕膯栴}都能一一回答并盡可能具體詳細(xì)，非誠勿進！
如果能留下QQ號詳細(xì)指導(dǎo)就更加感謝了！

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1樓 2012-06-20 16:57:35

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【答案】應(yīng)助回帖

感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1

問題好多啊？PS標(biāo)樣只要在所測樣品分子量范圍區(qū)間就可以了。一般濃度為10mg／mL，分子量低的話，可以稍高一些。樣品進樣由定量環(huán)來控制。

[ 發(fā)自手機版 http://www.gaoyang168.com/3g ]

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2樓2012-06-20 17:56:18

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引用回帖:

2樓: Originally posted by Pureland at 2012-06-20 17:56:18
問題好多��？PS標(biāo)樣只要在所測樣品分子量范圍區(qū)間就可以了。一般濃度為10mg／mL，分子量低的話，可以稍高一些。樣品進樣由定量環(huán)來控制。

那就是說我只要選擇從兩千六到五千的標(biāo)樣做標(biāo)準(zhǔn)曲線就可以了是嗎，那標(biāo)準(zhǔn)曲線的點會不會有點太少了，還有關(guān)于沖柱子和樣品濃度的問題您能否就3k~5k分子量的實際情況給些建議？

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3樓2012-06-20 18:15:38

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【答案】應(yīng)助回帖

樓主是否自己來管理GPC？如果有人管的話，可以問問管理員。

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4樓2012-06-20 19:03:03

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【答案】應(yīng)助回帖

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偶呀伊: 金幣+50, ★★★★★最佳答案 2012-06-21 09:28:34

引用回帖:

3樓: Originally posted by 偶呀伊 at 2012-06-20 18:15:38
那就是說我只要選擇從兩千六到五千的標(biāo)樣做標(biāo)準(zhǔn)曲線就可以了是嗎，那標(biāo)準(zhǔn)曲線的點會不會有點太少了，還有關(guān)于沖柱子和樣品濃度的問題您能否就3k~5k分子量的實際情況給些建議？...

一般標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍會很寬的，當(dāng)然一定要與色譜柱的分離范圍相匹配。我們實驗室GPC色譜柱的分離范圍是500~400萬，而我們的標(biāo)樣只能做到900~174萬。

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5樓2012-06-20 19:11:30

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【答案】應(yīng)助回帖

2.進樣前后要怎么沖柱子，用THF就可以嗎？要沖多長時間？
一般進樣前，我們會流動相小流速（0.1 mL/min)沖一夜的。

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6樓2012-06-20 19:13:52

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6樓: Originally posted by Pureland at 2012-06-20 19:13:52
2.進樣前后要怎么沖柱子，用THF就可以嗎？要沖多長時間？
一般進樣前，我們會流動相小流速（0.1 mL/min)沖一夜的。

非常感謝您的指導(dǎo)，由于我是新手，而且學(xué)校的儀器貌似也沒什么人用，所以有些抓瞎！
另外再請教一下，是不是每一個儀器靈敏度不同，所以進樣的濃度會不一樣，我們的儀器好像是WATERS的？對于我這個分子量比較低的會不會進10mg/ml濃度有些高！進樣針是否用HPLC的就可以，需要平頭的嗎？

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7樓2012-06-21 09:01:30

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5樓: Originally posted by Pureland at 2012-06-20 19:11:30
一般標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍會很寬的，當(dāng)然一定要與色譜柱的分離范圍相匹配。我們實驗室GPC色譜柱的分離范圍是500~400萬，而我們的標(biāo)樣只能做到900~174萬。...

那請問您之前在別的帖子里提到過可以把分子量相差大的配在一起，是不是還應(yīng)該保持每個分子量的濃度還是為10mg/ml，這樣如果兩個分子量的配在一起濃度就是20mg/ml了？

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8樓2012-06-21 09:04:35

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7樓: Originally posted by 偶呀伊 at 2012-06-21 09:01:30
非常感謝您的指導(dǎo)，由于我是新手，而且學(xué)校的儀器貌似也沒什么人用，所以有些抓瞎！
另外再請教一下，是不是每一個儀器靈敏度不同，所以進樣的濃度會不一樣，我們的儀器好像是WATERS的？對于我這個分子量比較低的 ...

我們的也是waters的，進樣針是平頭的，由儀器公司提供的。

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9樓2012-06-21 09:55:19

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8樓: Originally posted by 偶呀伊 at 2012-06-21 09:04:35
那請問您之前在別的帖子里提到過可以把分子量相差大的配在一起，是不是還應(yīng)該保持每個分子量的濃度還是為10mg/ml，這樣如果兩個分子量的配在一起濃度就是20mg/ml了？...

GPC示差檢測器的信號強度與聚合物溶液的分子量和濃度有關(guān)，濃度越大，信號越強。10mg/mL的濃度只是相對于10幾萬的分子量，分子量差異比較大的標(biāo)樣配混合溶液時應(yīng)酌情減小一些濃度。

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10樓2012-06-21 09:58:51

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