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1115291299鐵桿木蟲 (正式寫手)
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[求助]
做組織培養(yǎng)誘導(dǎo)不出愈傷組織
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| 正在做羌活（傘形科，羌活屬植物）的組織培養(yǎng)，以葉片為外植體，MS+6-BA+NAA的培養(yǎng)基。培養(yǎng)一個月了，在幾個不同比例6-BA與NAA的培養(yǎng)基上均未形成愈傷組織，只是葉片的面積擴(kuò)大了。請教高人指點(diǎn)，怎么改進(jìn)植物激素濃度。 |
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★
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我有幾點(diǎn)建議： 1、lz請先去參考同種植物（同種沒有就同屬，同屬沒有就同科）的組培文獻(xiàn)中的基本培養(yǎng)基配方，不同植物所需培養(yǎng)基能相差很大，比如蘭花是用MS，但木本植物通常都用DCR和WPM； 2、愈傷是從傷口中長的，你確定你的葉片是剪成小塊葉盤后再放進(jìn)去培養(yǎng)的嗎？ 3、不同外植體由于生理?xiàng)l件不同，培養(yǎng)時的反應(yīng)能相差很大，葉片不行的話就試試莖尖、莖段、根、花莖、子房、合子胚等組織； 4、誘導(dǎo)愈傷一般用2－4D和BA配合，NAA和BA組合通常是用來莖芽增殖的。激素的梯度設(shè)置很重要，這點(diǎn)最好也先參考同類文獻(xiàn)找個基準(zhǔn)值，然后再向上向下設(shè)不同梯度； 5、組培很耗時間，愈傷有可能一周就長，也有可能一個月才長，所以lz要有耐心，在一次實(shí)驗(yàn)中就多設(shè)置些處理和重復(fù)。 |
8樓2012-06-25 14:28:28
2樓2012-06-22 01:05:17
1115291299
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非常感謝您的解答。您郁悶，我也郁悶�。∏闆r是這樣的：我做的羌活這種植物的組培前人研究不多，所以暫時用的MS培養(yǎng)基，25℃，pH5.8培養(yǎng)，都是一般植物通用的營養(yǎng)與培養(yǎng)條件。至于無菌環(huán)境，您覺得我會二到不知道培養(yǎng)的東西被污染了嗎?關(guān)于操作，之前做的草莓的，現(xiàn)在也生根長成小植株了，羌活這個現(xiàn)在觀察葉片也在長得可以，沒有發(fā)現(xiàn)褐化或者消毒液殘留造成的毒害，葉片在長大，只是沒有愈傷組織發(fā)生，其他會有什么影響暫時沒想到，可能也不知道，還請您指教。我主要是想各位高人在植物激素這塊支支招。最后，針對您的鄙視，鑒于我還是一名本科生，也沒系統(tǒng)得學(xué)習(xí)植物學(xué)，況且眼高手低我也認(rèn)，希望您理解一下。 |
7樓2012-06-22 15:19:50
niushuaiji
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3樓2012-06-22 09:25:35
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4樓2012-06-22 09:34:16
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