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xiongL銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
什么有機溶劑不會使葡萄糖氧化酶變性？
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如題，我想找一種有機溶劑，能和水互溶，把葡萄糖氧化酶放入水——有機相中反應。有什么有機溶劑不會讓酶變性的？或是變性很小，水：有機溶劑的配比？ |
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至尊木蟲 (知名作家)
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3樓2012-06-25 15:40:42
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【答案】應助回帖
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看來與水性質接近的有機物，比如少量甲醇或乙醇： 高純度葡萄糖氧化酶為淡黃色粉末，易溶于水，完全不溶于乙醚、氯仿、丁醇、吡啶、甘油、乙二醇等。50％丙酮、66％甲醇能使其沉淀，一般制品中含有過氧化氫酶。分子量為150000左右，每摩爾酶含2摩爾FAD。酶的最大光吸收波長為377nm和455nm。在紫外光下無螢光，但是在熱、酸或堿處理后具有特殊的綠色。固體酶制劑在0℃下保存至少穩(wěn)定兩年，在－15℃下穩(wěn)定8年。葡萄糖氧化酶穩(wěn)定的pH范圍為3～4，最適pH5，如果沒有葡萄糖等保護劑的存在，pH大于8或小于3，葡萄糖氧化酶將迅速失活。葡萄糖氧化酶的作用溫度為30～60℃，該酶對EDTA、KCN及NaF不受阻抑，但HgCl、AgCl、對氯汞苯甲酸和苯肼對酶有阻抑。 葡萄糖氧化酶的催化特性： 葡萄糖氧化酶的每個酶分子中含有兩單位FAD（黃素腺嘌呤=核苷酸），作為受氫體催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸，并產生過氧化氫： 葡萄糖氧化酶的催化反應，按條件不同有如下三種形式： 在沒有過氧化氫酶存在下，每摩爾葡萄糖氧化酶氧化時消耗1摩爾氧氣。 C6H12O6＋O2→C6H12O7＋H2O2 在有過氧化氫酶存在下，每摩爾葡萄糖氧化酶氧化時消耗0.5摩爾氧氣。 C6H12O6＋1/2O2→C6H12O7 在有乙醇和過氧化氫酶存在下，過氧化氫同時被用于乙醇的氧化作用，此時，每摩爾葡萄糖氧化酶氧化時消耗1摩爾氧氣。 C6H12O6＋C2H5OH＋O2→C6H12O7＋CH3CHO＋H2O 此外，葡萄糖氧化酶催化β－D－葡萄糖的速度要比催化α－D－葡萄糖的速度快150倍。 |
2樓2012-06-25 15:37:55
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