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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 微生物 » 實驗/技術 » 關于噬菌體侵染細菌
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lihao1988903金蟲 (正式寫手)
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[求助]
關于噬菌體侵染細菌
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| 最近做的兩次微生物發(fā)酵罐發(fā)酵都被噬菌體侵染了。我們做的是30L 大腸桿菌發(fā)酵，接種到發(fā)酵罐一切正常，菌種生長到一定OD后，溶氧就急劇上升并OD下降到1一下，菌液變清亮。因為第一次污染后專門對環(huán)境和設備又做了次消毒處理，結果第二次還是污染了。我想請問各位大蝦，噬菌體會在什么時候侵染了大腸桿菌？侵染了大腸桿菌后多長時間才會釋放出來使OD下降？因為接種以后，發(fā)酵罐沒有開過口，會被污染嗎？如果是濾器進去的為啥剛接種是沒有呢？各位大蝦分析下是什么時候被污染噬菌體的呢？ |
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【答案】應助回帖
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rainwander: 金幣+2, 鼓勵交流 2012-07-01 22:26:56
感謝參與，應助指數(shù) +1
rainwander: 金幣+2, 鼓勵交流 2012-07-01 22:26:56
| ，你可以先用沒有污染的菌做涂布，菌濃度大培養(yǎng)使得形成菌苔，然后在菌苔表面涂幾個點（用接種環(huán)）的懷疑污染了的培養(yǎng)基，培養(yǎng)，看看是否會出現(xiàn)溶菌現(xiàn)象。（既原來看到完整的菌苔，在接種后出現(xiàn)了空的溶菌斑）如果出現(xiàn)了溶菌現(xiàn)象則確實證明了是噬菌體。如果是噬菌體的話就比較討厭了。需要對所有可能的物品進行消毒。（不是滅菌）包括房間，容器，器皿等等。 |
4樓2012-06-28 20:23:27
371522029
金蟲 (正式寫手)
小魚兒
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【答案】應助回帖
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amisking: MicEPI+1 2012-06-28 20:09:41
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首先我建議你不能這么武斷的認為是噬菌體。接種的時候接種口用棉花蘸酒精點燃，然后接種。生長到OD值還沒有下降，或者剛剛下降不久馬上進行一次補料，補料后觀察OD值是否繼續(xù)下降，補料的培養(yǎng)基是很濃的，控制好體積，并滅好菌。補料后如果發(fā)現(xiàn)OD值只有少量上升，并且沒維持多久就繼續(xù)飛速下降那么就可能是污染了，補料后OD值上升，溶解氧下降，稱現(xiàn)一定規(guī)律，則表明之前是培養(yǎng)基耗盡。 如果證明了有很大可能是污染為了確認，你可以先用沒有污染的菌做涂布，菌濃度大培養(yǎng)使得形成菌苔，然后在菌苔表面涂幾個點（用接種環(huán)）的懷疑污染了的培養(yǎng)基，培養(yǎng)，看看是否會出現(xiàn)溶菌現(xiàn)象。（既原來看到完整的菌苔，在接種后出現(xiàn)了空的溶菌斑）如果出現(xiàn)了溶菌現(xiàn)象則確實證明了是噬菌體。如果是噬菌體的話就比較討厭了。需要對所有可能的物品進行消毒。（不是滅菌）包括房間，容器，器皿等等。 |
3樓2012-06-28 19:38:32
5樓2012-06-28 20:24:08
421095972
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6樓2012-06-29 08:47:43
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