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pffeng新蟲 (初入文壇)
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[求助]
SSR條帶莫名變淺，多次試驗無果，求熱心人指點，有圖
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LZ年前開始對實驗群體進(jìn)行SSR引物篩選，當(dāng)時一切正常，條帶清晰， 但是年后開始正式上群體的時候，條帶一直很淺  前后試驗藥品和體系以及PCR時的儀器均沒有變化，后LZ對體系進(jìn)行調(diào)整，一般情況是，調(diào)整體系的時候條帶清晰無異常，但是一旦用調(diào)整后的體系做群體，條帶就變淺，藥物沒有問題，因為偶爾的會出幾個好的結(jié)果。 求好心人指點~~~~ |
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pffeng
新蟲 (初入文壇)
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2樓2012-06-28 18:14:15
wu_shiyong
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【答案】應(yīng)助回帖
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小丹木木: 金幣+3, 鼓勵交流經(jīng)驗 2012-07-02 13:44:20
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小丹木木: 金幣+3, 鼓勵交流經(jīng)驗 2012-07-02 13:44:20
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我做這個2年半還真沒跑出來這樣差的膠，你那篩引物的圖也太差啦！光從上面看你的膠和染色都有問題。 我們實驗室用的是天根的酶和dNTP 體系 10 buffer 1 dNTP 0.2 酶 0.2 引物P1 0.5(濃度5p的) P2 0.5 DNA 1（根據(jù)你DNA濃度調(diào)節(jié)） 加水補(bǔ)足10 不知道你是做什么物種的，群體多大。你要是急的話可以發(fā)我郵箱xxfxwushiyong@163.com 看見會盡快回復(fù)你的。 光從上面看你的膠和染色都有問題。 |
3樓2012-06-29 16:02:43
pffeng
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4樓2012-07-02 00:12:23
5樓2013-10-21 11:57:31
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