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donzen1981金蟲 (正式寫手)
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[求助]
求助：黃曲霉毒素測(cè)定過程有哪些需要特別注意的地方？ 已有1人參與
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| 如題：中藥材黃曲霉毒素測(cè)定過程有哪些需要特別注意的地方？使用熒光檢測(cè)器需要注意什么��？ |
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xbqewpq
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參考一下這篇文獻(xiàn) 高效液相色譜儀檢測(cè)分析中藥材(酸棗仁)中黃曲霉毒素 黃曲霉毒素(AFT)是一類化學(xué)結(jié)構(gòu)類似的化合物，均為二氫呋喃香豆素的衍生物。黃曲霉毒素是主要由黃曲霉 (aspergillus flavus))寄生曲霉 (a.parasiticus))產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物，在濕熱地區(qū)食品和飼料中出現(xiàn)黃曲霉毒素的機(jī)率最高。 一、高效液相色譜儀檢測(cè)黃曲霉毒素實(shí)驗(yàn)材料： 1.1免疫親和柱：博納艾杰爾黃曲霉毒素總量免疫親和柱 訂貨號(hào)：HC09001 1.2色譜柱：Venusil MP C18 (4.6*150mm, 5μm)，訂貨號(hào)：VA951505-0 二、高效液相色譜儀檢測(cè)黃曲霉毒素實(shí)驗(yàn)方法： 1.1混合對(duì)照品溶液的制備 精密量取黃曲霉毒素混合標(biāo)準(zhǔn)品(黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2標(biāo)示濃度分別為1. 0µg/mL、0.3µg/mL、1.0µg/mL、 0.3µg/mL)1mL，置10mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，作為儲(chǔ)備液。精密量取儲(chǔ)備液1mL，置50mL量瓶中，用70％甲醇溶液稀釋至刻度，即得。 1.2供試品溶液的制備 取供試品粉末約10g，精密稱定，加入氯化鈉2g，精密加入70%甲醇溶液100mL，超聲處理20分鐘，離心5分鐘(離心速度8000轉(zhuǎn)/分)，精密量取上清液10mL，置50mL量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，精密量取25mL，通過免疫親和柱，流速每分鐘2-3mL，用水5mL淋洗，洗液棄去,使空氣進(jìn)入柱子,再用甲醇1.4mL分2次洗脫，收集洗脫液，用水定容至2mL，即得。 1.3測(cè)定法 分別精密吸取上述混合對(duì)照品溶液20µl、供試品溶液20µl，注入液相色譜儀，測(cè)定峰面積，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品中相當(dāng)于黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2的量，計(jì)算，即得。 三、高效液相色譜儀檢測(cè)黃曲霉毒素色譜條件： 儀器：高效液相色譜儀(LC600) 熒光檢測(cè)器：光化學(xué)柱后衍生裝置(南京科捷) 色譜柱：Venusil MP C18 (4.6*150mm) ,定貨號(hào)：VA951505-0 進(jìn)樣量：20µl;柱溫：40℃;流速：1.1mL/min 四、高效液相色譜儀技術(shù)參數(shù)： 高效液相色譜儀/LC—P600型高壓恒流泵 LC-P600高壓恒流泵是微處理器智能控制的往復(fù)式雙柱塞并聯(lián)泵，具有工作壓力高、脈動(dòng)小、穩(wěn)定可靠、操作方便等特點(diǎn)。其機(jī)械組件由電腦輔助設(shè)計(jì)，各主要零部件均在世界先進(jìn)的數(shù)控加工中心制造，因此具有加工精確度高、泵體密封性能好、零件的互換性好等特點(diǎn)。 柱塞桿采用浮動(dòng)導(dǎo)向結(jié)構(gòu)，驅(qū)動(dòng)凸輪由高強(qiáng)度合金鋼制造。采用微處理器控制微步驅(qū)動(dòng)電路，使得驅(qū)動(dòng)泵的步進(jìn)電機(jī)運(yùn)行平穩(wěn)、噪聲低、速度調(diào)節(jié)范圍大。LC-P600高壓恒流泵在壓力為0～42Mpa的范圍內(nèi)，流量可以從0.001mL/min開始到9.999mL/min。這樣滿足了常規(guī)分析到微流量分析的需要。 在單泵等度分析時(shí)，可根據(jù)該儀器上全漢字顯示液晶屏的提示語(yǔ)句，通過四個(gè)功能鍵就可變換各種操作模式，并且可以方便地設(shè)置流量、壓力上下限、持續(xù)工作時(shí)間、壓力單位等參數(shù)。 LC-P600高壓恒流泵具有過程監(jiān)測(cè)功能。微處理器實(shí)時(shí)控制泵的流量和檢測(cè)輸液壓力。在壓力超限的情況下，報(bào)警并自動(dòng)停止泵的運(yùn)行。 可采用LC-WS100工作站,通過RS232接口，控制多達(dá)四臺(tái)泵的運(yùn)行，建立多元梯度分析系統(tǒng)。 LC-P600高壓恒流泵整體結(jié)構(gòu)采用模塊化設(shè)計(jì)，包括機(jī)械部分和電路部分都可以獨(dú)立裝拆，因此故障檢查和調(diào)換都非常方便。 LC-P600高壓恒流泵采用雙柱塞并聯(lián)泵結(jié)構(gòu)，雙泵頭交替輸液。在同樣輸液量的情況下，它的輸出脈動(dòng)要比串聯(lián)泵低得多，而活塞桿和密封圈壽命要比常規(guī)串聯(lián)泵長(zhǎng)一倍�！ � 高效液相色譜儀/LC—UV600型紫外檢測(cè)器 LC-UV600紫外檢測(cè)器采用了平行的雙錐孔流通池，樣品池和參照池完全處于對(duì)等的條件。錐孔設(shè)計(jì)的流通池，可以在同樣的池體積情況下，提高通過池孔的光能量，明顯降低了儀器的靜態(tài)噪音和信號(hào)漂移。 光路系統(tǒng)采用了精密定位結(jié)構(gòu)，所以精度高、偏移小。氘燈座和光路系統(tǒng)采用熱隔離安裝技術(shù)，降低了儀器的穩(wěn)定時(shí)間，并且使氘燈的發(fā)熱對(duì)光路系統(tǒng)的影響降到最低。 控制電路采用多微處理器結(jié)構(gòu)，分別管理信號(hào)采集、數(shù)據(jù)處理、系統(tǒng)控制和通信。LC-UV600紫外檢測(cè)器在做等度分析時(shí)，可以方便地通過全漢字的液晶屏與七個(gè)功能鍵，設(shè)置紫外光波長(zhǎng)、濾波常數(shù)、輸出量程、運(yùn)行時(shí)間等參數(shù)。并且可以實(shí)現(xiàn)開關(guān)氘燈、光譜掃描、啟動(dòng)分析程序等功能。 該儀器的另一大特點(diǎn)是：LC-UV600紫外檢測(cè)器獨(dú)特地使用了數(shù)字信號(hào)直接輸出的線路結(jié)構(gòu)。相比以往的紫外檢測(cè)器色譜信號(hào)大多數(shù)采用模擬信號(hào)輸出或者是內(nèi)部數(shù)字信號(hào)處理后，再轉(zhuǎn)換成模擬信號(hào)輸出到色譜數(shù)據(jù)處理裝置，然后再經(jīng)過模數(shù)轉(zhuǎn)換。這樣多重的轉(zhuǎn)換勢(shì)必導(dǎo)致信號(hào)畸變和干擾。而LC-UV600紫外檢測(cè)器通過RS232接口將數(shù)字化信號(hào)毫無(wú)損失地送到LC-WS600工作站進(jìn)行對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換和積分處理。 LC-UV600紫外檢測(cè)器可以通過LC-WS600工作站上的圖形化界面，方便地實(shí)現(xiàn)控制氘燈開關(guān)、光譜掃描、繼電器開關(guān)、波長(zhǎng)掃描等功能。 |
2樓2012-07-11 15:24:49
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| 前處理避免強(qiáng)光照射，過柱注意流速，如果不是在線光衍生，三氟乙酸衍生和氮吹時(shí)注意溫度控制，標(biāo)液和樣品最好同時(shí)衍生，F(xiàn)LD沒什么要注意的，注意做加標(biāo) |
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donzen19813樓2012-07-12 20:01:07
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7樓2015-09-07 10:56:55
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