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質(zhì)粒提取 已有8人參與
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我質(zhì)粒的大小是5368bp，為什么質(zhì)粒提取后電泳條大這么不在5368bp，而落在更大的條帶？為什么兩次酶切都出現(xiàn)降解？從電泳圖譜看我的實(shí)驗(yàn)算不算成功，如果不成功的話(huà)，還有哪些需要改進(jìn)的地方？ 質(zhì)粒條帶 酶切條帶 |
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小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
小丹木木: 金幣+3, 呵呵，好全面的分析哇 2012-07-13 16:04:38
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
小丹木木: 金幣+3, 呵呵，好全面的分析哇 2012-07-13 16:04:38
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太多問(wèn)題了： 1. 提的質(zhì)粒，蛋白污染特別嚴(yán)重，上樣孔那么亮，這可能都要直接干擾酶切了； 2. 質(zhì)粒沒(méi)有酶切前，跑出來(lái)的大小肯定和線性的Marker大小不一樣的，通常有比較明顯的3條帶； 3. 酶切的質(zhì)粒濃度太低了，5k多的質(zhì)粒，這樣淡，一是不好分析，二是往下做連接什么的都會(huì)很困難； 4. 把凝膠成像儀擦擦干凈，電泳buffer換換，太臟了； 5. 電泳跑的時(shí)間太長(zhǎng)了，明顯已經(jīng)分開(kāi)了，還猛跑，全歪了； 還有，不想再找了~ |
7樓2012-07-12 21:43:37
Marado
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4樓2012-07-12 11:50:15
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