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玻底培養(yǎng)皿/板的簡(jiǎn)介及使用方法 已有4人參與
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如今市場(chǎng)上在細(xì)胞培養(yǎng)及觀察領(lǐng)域又出了新的耗材——玻底皿/板,這給細(xì)胞觀察帶來很大便利,然而很多蟲友對(duì)玻底皿/板還不是很了解,在這里我就對(duì)它們做一些下詳細(xì)的介紹,希望對(duì)各位蟲友有用。 •玻底皿——簡(jiǎn)介 又稱玻底皿,玻底皮氏皿,玻底微孔皿,玻底滅菌培養(yǎng)皿,蓋玻片底皿,其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是在塑料平皿的圓形底部中央打出一個(gè)直徑1 cm左右的圓孔并從平皿底部的外面粘上一片厚度約為0.17mm透光性極好的蓋玻片以密封圓孔配有平皿蓋。 使用時(shí),將相配套的玻底皿支架放到顯微鏡的載物臺(tái)上。再將載有樣品的玻底皿放到該玻底皿支架,即可用顯微鏡觀察樣品或者用共聚焦顯微鏡掃描樣品。 •玻底皿——用途 玻底培養(yǎng)皿和玻底培養(yǎng)板主要用于要求放大倍數(shù)高、培養(yǎng)器皿底面透光性能好的顯微實(shí)驗(yàn),如激光共聚焦顯微實(shí)驗(yàn)、熒光顯微實(shí)驗(yàn)和相差顯微實(shí)驗(yàn)等。玻底培養(yǎng)皿和玻底培養(yǎng)板底面薄,透光性能好, 滿足了上述實(shí)驗(yàn)的要求。同時(shí)玻底培養(yǎng)皿和玻底培養(yǎng)板底面的小孔也減少了實(shí)驗(yàn)過程中抗體等試劑的使用量。 •玻底皿應(yīng)用的顯微鏡領(lǐng)域一般包括:共聚焦顯微鏡,高分辨率顯微鏡,熒光成像,活細(xì)胞成像,相差顯微鏡,微分干涉相差顯微鏡,偏振光顯微鏡,延時(shí)攝影,視屏增強(qiáng)顯微鏡。玻底皿同時(shí)適合于GFP和顯微注射技術(shù)研究結(jié)合領(lǐng)域。 •玻底板——簡(jiǎn)介 玻底多孔培養(yǎng)板與玻底皿具有相同的玻底和光學(xué)特性,允許研究者使用高批量生產(chǎn),高通量篩選,珍貴試劑使用的量更少。 •玻底板——用途 常規(guī)玻底皿可以使用的大多數(shù)領(lǐng)域都可以使用多孔玻底板。最常應(yīng)用于熒光/免疫顯微鏡,共聚焦,實(shí)時(shí)成像,顯微注射,電子視頻顯微鏡,相差和延時(shí)光學(xué)顯微鏡。 玻底板——優(yōu)點(diǎn) 多孔玻底板的最大優(yōu)勢(shì)是可以在同一塊板上在一致的條件下培養(yǎng)6,12,24,95孔培養(yǎng)物。多孔板適合高通量,高容量篩選領(lǐng)域。 利用多孔板分析是流線型的,因?yàn)橹恍杼幚硪粋(gè)板(相對(duì)于用多個(gè)皿來說)。 對(duì)一些領(lǐng)域來說,使用多孔板處理培養(yǎng)物變得簡(jiǎn)單化(例如:發(fā)光)多孔板的孔徑更小,對(duì)于小體積的珍貴試劑來說是極其有效的。 玻底皿兼有平皿和蓋玻片的雙重特點(diǎn): ①其底部的蓋玻片為透光性極好的光學(xué)玻璃,透光性比塑料平皿好; ②底部蓋玻片厚度不大于0.17mm,適用于高倍鏡觀察和高質(zhì)量成像; ③觀察時(shí).細(xì)胞上方有液體覆蓋,不必加蓋玻片,因此能夠保持細(xì)胞等樣品不變形,不干燥,保持其原有形態(tài); ④可以在皿中隨時(shí)加入或吸出液體,因此可以隨時(shí)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行洗滌或加刺激物等處理,利于維持細(xì)胞的生長(zhǎng)和實(shí)驗(yàn)操作; ⑤用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞時(shí),可以蓋著玻底皿蓋觀察,保持細(xì)胞的無菌狀態(tài),利于細(xì)胞培養(yǎng): ⑥節(jié)省試劑和細(xì)胞,簡(jiǎn)化操作過程。 玻底皿/板的使用方法參考的是NEST玻底皿/板的使用方法,具體如下 : 玻底培養(yǎng)皿和玻底培養(yǎng)板使用方法 1 預(yù)平衡:在玻底培養(yǎng)皿加入3ml培養(yǎng)液,在培養(yǎng)箱中放置15分鐘。 2 加細(xì)胞:吸去培養(yǎng)液,在底孔中加入500ul含細(xì)胞的培養(yǎng)液。在培養(yǎng)箱中放置 2 小時(shí),讓細(xì)胞沉降貼壁。 3 加培養(yǎng)液:小心加入2-3ml不含細(xì)胞的培養(yǎng)液。該步驟用于為細(xì)胞提供足夠的培養(yǎng)液,同時(shí)減少由于水份揮發(fā)帶來的滲透壓的變化。 *根據(jù)實(shí)驗(yàn)的要求,可以合并步驟2和3,在預(yù)平衡后直接加入2-3毫升含細(xì)胞的培養(yǎng)液。 |
免疫實(shí)驗(yàn) |
| 謝謝分享. |
金蟲 (著名寫手)
| 細(xì)胞顯微鏡多是指倒置顯微鏡,主要是為了適應(yīng)生物學(xué)、醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域中的組織培養(yǎng)、細(xì)胞離體培養(yǎng)、浮游生物、環(huán)境保護(hù)、食品檢驗(yàn)等顯微鏡觀察。由于使用領(lǐng)域的限制,被檢測(cè)物體需要放置在培養(yǎng)皿中,就要求倒置顯微鏡的物鏡和聚光鏡的工作距離加長(zhǎng),能直接對(duì)培養(yǎng)皿中的被檢測(cè)物體進(jìn)行顯微鏡觀察和研究,所以,物鏡、聚光鏡和光源都是顛倒過來的,顧名思義就是“倒置顯微鏡”。 |
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