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yajune木蟲 (職業(yè)作家)
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[求助]
測(cè)ROS(活性氧)的樣品能否冷凍?
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| 想用DCFH-DA法測(cè)斑馬魚腦組織ROS含量,賣試劑盒的那人說(shuō)要用新鮮的組織才可以,但是我這樣品很多,基本不可能在解剖出樣品的當(dāng)天測(cè),需要冷凍后再測(cè)。想問(wèn)問(wèn)大家有沒(méi)有用冷凍后的樣本做過(guò)?冷凍真的影響很大么?有沒(méi)有不受冷凍影響的測(cè)ROS的試劑盒或方法?跪求做過(guò)或了解的大神回答 |
木蟲 (正式寫手)
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ROS提取出來(lái)保存?還真沒(méi)聽說(shuō)過(guò),個(gè)人覺得這種方法堅(jiān)決堅(jiān)決不行,首先搞清楚什么是ROS,ROS的存在是非常短暫非常不穩(wěn)定的,怎么可能提取保存? 看樓主用DCF,肯定是測(cè)過(guò)氧化氫的,個(gè)人覺得必須保證用新鮮材料測(cè),如果你把材料冷藏,你能保證你對(duì)ROS的刺激條件不變么?明顯不能保證。 還有我覺得,不同的刺激條件對(duì)ROS的產(chǎn)生時(shí)間是不同的,所以建議樓主先摸清楚最佳時(shí)間,我之前做了很多次才摸出來(lái)。 別用液氮什么保存,ROS的量絕對(duì)會(huì)改變,說(shuō)白了,ROS就是個(gè)第二信號(hào)分子,且非常不穩(wěn)定,周期短什么的。 |
木蟲 (職業(yè)作家)
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