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輕清1106
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[求助]
植物DNA提取
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我用2%CTAB抽提液提取植物葉綠體DNA，圖中前12個(gè)孔是氯仿異戊醇抽提3次之后，直接用兩倍無(wú)水乙醇沉淀-80℃ 30min，70%乙醇洗滌得到的；后12個(gè)樣品，氯仿異戊醇提2次后，先用-20℃預(yù)冷的異丙醇沉淀30min，再用含SDS的SSTE溶液溶解沉淀，之后再用等體積的氯仿異戊醇抽提10min，然后再是兩倍無(wú)水乙醇沉淀-80℃ 30min，70%乙醇洗滌沉淀。電泳檢測(cè)結(jié)果如圖，紫外熒光檢測(cè)其濃度，OD260/OD280只在1.12左右，這樣的結(jié)果對(duì)SRAP-PCR和ISSR-PCR有影響嗎？請(qǐng)各位指教，謝謝！ |
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輕清1106 
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3樓2012-07-26 23:08:17
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【答案】應(yīng)助回帖
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小丹木木: 金幣+2, 鼓勵(lì)應(yīng)助 2012-07-20 13:40:54
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你的OD260/OD280值太低，說(shuō)明你的樣品里蛋白含量高。 樓主你的260/230比值如何？ 蛋白多一點(diǎn)對(duì)PCR會(huì)有影響，但是不會(huì)太大，如果260/230如果數(shù)值太低說(shuō)明里面的其他雜質(zhì)如酚，醇等太多會(huì)嚴(yán)重影響結(jié)果。 樓主可以用其他人已經(jīng)發(fā)表的做的比較好的引物做下PCR，個(gè)人認(rèn)為是影響不大的。 |
2樓2012-07-20 08:23:11
水晶海豚00
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4樓2012-07-28 08:54:45
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5樓2012-07-30 15:58:52
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