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實(shí)時(shí)定量PCR，NTC出現(xiàn)熒光曲線
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跟著一個(gè)博士 做了qPCR，probe是TaqMan，反應(yīng)體系15uL。標(biāo)準(zhǔn)曲線非常好，R平方在3個(gè)9以上。 但是NTC有3個(gè)莫名其妙的淺綠色的曲線，x軸上非常向后。她是一個(gè)老手了，做了2年多了，她說(shuō)這種污染好象無(wú)法解決。 說(shuō)明一下她的操作：提取DNA和PCR過(guò)程中沒(méi)有對(duì)槍尖和離心管進(jìn)行滅菌，她說(shuō)不必要。而且，沒(méi)有加UNG酶。 我認(rèn)為有可能是PCR過(guò)程中沒(méi)有使用滅菌槍尖和離心管的原因，另外，也可能是二聚體? 請(qǐng)高手指教。 |
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2樓2012-07-22 16:55:29
tiani_tan
金蟲 (小有名氣)
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3樓2012-07-23 12:06:33
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