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小鼠取血和取腦提RNA
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昨天第一次嘗試小鼠腹主動(dòng)脈取血，預(yù)處理了EP管和留了14ul（0.1M）EDTA，但發(fā)現(xiàn)一次性注射器取血時(shí)有血凝現(xiàn)象，就改預(yù)處理注射器，處理完留了一點(diǎn)未知量的EDTA在注射器里，不知道確切的多少血量用多少EDTA合適。另外取血抽注射器的時(shí)候總覺(jué)得針頭在血管里動(dòng)，是否出血管了，不會(huì)吸到其他的腹腔液體吧？怎么保證一定是血管里的血呢，小鼠的血管不像大鼠好控制。 取血后，我用PBS心臟灌流后取腦，能得到白色的腦（沒(méi)血），但灌流過(guò)程中老鼠死亡，擔(dān)心取得的腦是否有RNA降解。從取血到取到腦大概20-30分鐘，老鼠灌流死亡到取腦大概10分鐘，RNA會(huì)降解嗎。 如果同一只小鼠取血和取腦提RNA，什么方法比較好，看有人斷頭取血及取腦，這個(gè)方法可行？ 另外取腦提RNA有什么注意事項(xiàng)？ 怎么防止RNA酶污染？比如灌流時(shí)用冰浴PBS比較好，取腦也在冰上是否可防止RNA降解？ |
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