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linxiaoxia金蟲 (初入文壇)
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[求助]
熒光量子產(chǎn)率求助
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| 如果一個(gè)熒光物質(zhì)的激發(fā)波長在360nm，發(fā)射波長在518nm，想用參比法測它的熒光量子產(chǎn)率，應(yīng)選什么物質(zhì)作為參比？ |
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金蟲 (正式寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
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二氯熒光素量子產(chǎn)率的測定 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br /> 1、了解熒光分析法及測量熒光物質(zhì)的熒光量子產(chǎn)率的基本原理。 2、掌握二氯熒光素量子產(chǎn)率的測量方法和相關(guān)影響因素。 二、方法原理 熒光分析法在有機(jī)電致發(fā)光、生物醫(yī)藥、臨床診斷等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。高性能熒光材料的制備已成為這些領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)與前沿，而這些熒光材料的熒光量子產(chǎn)率的高低直接影響它們的性能優(yōu)劣。熒光量子產(chǎn)率（YF）即熒光物質(zhì)吸光后所發(fā)射的熒光的光子數(shù)與所吸收的激發(fā)光的光子數(shù)之比值。它的數(shù)值在通常情況下總是小于1。YF的數(shù)值越大則化合物的熒光越強(qiáng)，而無熒光的物質(zhì)的熒光量子產(chǎn)率卻等于或非常接近于零。 熒光量子產(chǎn)率一般采用參比法測定。即在相同激發(fā)條件下，分別測定待測熒光試樣和已知量子產(chǎn)率的參比熒光標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)兩種稀溶液的積分熒光強(qiáng)度（即校正熒光光譜所包括的面積）以及對一相同激發(fā)波長的入射光（紫外-可見光）的吸光度，再將這些值分別代入特定公式進(jìn)行計(jì)算，就可獲得待測熒光試樣的量子產(chǎn)率： Yu = Ys · · Yu、Ys —待測物質(zhì)和參比標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的熒光量子產(chǎn)率； Fu、Fs —為待測物質(zhì)和參比物質(zhì)的積分熒光強(qiáng)度； Au、As —為待測物質(zhì)和參比物質(zhì)在該激發(fā)波長的入射光的吸光度（A=εbc）。 運(yùn)用此公式時(shí)一般要求吸光度As、Au低于0.05。參比標(biāo)準(zhǔn)樣最好選擇其激發(fā)波長值相近的熒光物質(zhì)。有分析應(yīng)用價(jià)值的熒光化合物的Yu一般常在0.1-1之間。 三、儀器和試劑 1、分子熒光光譜儀；紫外－可見分光光度計(jì)； 2、二氯熒光素（5.0μg·mL-1）待測試樣溶液(含1.0mol·L-1 NaOH水溶液)；羅丹明B（5.0μg·mL-1）參比標(biāo)準(zhǔn)溶液（溶劑為無水乙醇）； 3、熒光比色皿一個(gè)，紫外石英比色皿一對；10 mL具塞比色管、移液管。 四、實(shí)驗(yàn)步驟 1、移取所需濃度的二氯熒光素與羅丹明B溶液，用相應(yīng)溶劑稀釋至10.0 mL（A505nm<0.05），在紫外－可見分光光度計(jì)上測定其吸收光譜曲線；分別測定它們在505 nm處的吸光度。 2、移取上述相同的溶液于熒光比色皿中，在熒光儀上分別掃描其熒光激發(fā)光譜及發(fā)射光譜；分別測定它們以505 nm為激發(fā)波長時(shí)的熒光發(fā)射光譜。 五、結(jié)果處理 1、計(jì)算二氯熒光素和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)羅丹明B的熒光光譜的相對積分面積。 2、從相關(guān)資料查閱參比標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)羅丹明B在乙醇溶劑中的量子產(chǎn)率。 3、將所獲得的各相關(guān)數(shù)據(jù)代入熒光量子產(chǎn)率計(jì)算公式計(jì)算二氯熒光素溶液的量子產(chǎn)率數(shù)值。 六、注意事項(xiàng) 1、如何測定某物質(zhì)的熒光激發(fā)光譜與發(fā)射光譜曲線？ 2、測量某熒光物質(zhì)的熒光量子產(chǎn)率時(shí)，如何選擇熒光參比標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，它的作用是什么？ 3、吸光度的測定與測定熒光光譜的面積時(shí)的激發(fā)波長為什么要一致？ 4、為什么要求待測物質(zhì)與熒光參 |
2樓2012-08-04 11:19:37
linxiaoxia
金蟲 (初入文壇)
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3樓2012-08-05 17:55:36
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