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zhaoyanying銅蟲 (初入文壇)
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Trizol法提取細(xì)胞總RNA步驟 從-80中取出加了Trizol的樣品,室溫解凍后加入20ul氯仿,劇烈震蕩30s,室溫靜置10min,12000轉(zhuǎn)、4攝氏度、10min。 取上清加到另一個EP管中,加入500ul異丙醇,混勻,室溫靜置10min,12000轉(zhuǎn)、4攝氏度、10min。 小心棄掉上清,加入1ml75%的酒精洗滌(75%酒精配置時用的是最后溶解RNA時用的那個DEPC處理水) 重復(fù)步驟3一次 棄掉上清,室溫下倒置3-5min,使酒精揮發(fā)掉 加入40ulDEPC水溶解RNA 注:.盛裝試劑的瓶子用DEPC水處理過, 槍頭用的是買的 也試過用我自己用DEPC處理的水來配置酒精和回收RNA,但是效果都不好,所 以現(xiàn)在就用買的那種DEPC處理水配置酒精和回收RNA 幫我看看哪里有問題,今天提了一次什么都沒有 |
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